AD-PEDF对胃癌SGC7901细胞和人脐静脉血管内皮细胞体外作用的研究.pdfVIP

进捌医堂睦亟±堂僮迨塞 目 录 1 外作用的研究…………………………………………………1 1．1 0000 0………………1 中文摘要…………………………………0 1．2 m OOQI……………………………………4 英文摘要……………Q 1．3 前言……………………………………………………………7 1．4 材料与方法……………………………………………………11 1．5 结果……………………………………………………………27 1．6 讨{仑……………………………………………………………40 1．7 结{念……………………………………………………………44 1．8 参考文献………………………………………………………45 1．9 英汉缩略词对照表……………………………………………50 2 致谢……………………………………………………………51 3 色素上皮衍生因子在肿瘤治疗中的研究进展(综述) 遂捌匡堂隧亟±堂焦迨塞 ㈣必 Ad．PEDF对人胃癌SGC790 1细胞及人脐静脉 血管内皮细胞体外作用的研究 摘 要 目的：本研究采用腺病毒载体介导的重组色素上皮源性因子 (recombinant factor pigmentepithelium-derived 以及对SGC7901细胞及脐静脉血管内皮细胞增殖、迁移、成管的影响，探 讨PEDF抗血管生成及对胃癌细胞生长、转移的作用，探索胃癌基因治疗 的新方法。 毒扩增，收集病毒上清液。(2)扩增后的病毒上清液分别通过RT-PCR反 应和Western Ad．GFP病毒上清液以最佳感染复数感染体外培养的胃癌细胞系 后收集各组细胞条件培养基，运用Western 白分泌表达情况。(4)体外培养胃癌细胞系SGC7901及脐静脉血管内皮细 胞，运用CCK．8试剂盒检测胃癌细胞系7901及脐静脉血管内皮细胞，在 不同条件下的增殖抑制率。(5)体外培养胃癌细胞系SGC7901及脐静脉血 管内皮细胞，运用Transwell小室研究其在不同条件下的侵袭及迁移的体外 生物学活性。(6)体外培养脐静脉血管内皮细胞，观察在各组不同条件下 血管生成形态，研究色素上皮衍生因子对体外血管内皮细胞生物活性。本 实验采用完全随机单因素方差分析法(ANOVA法)对各组的检测结果进 进趔医堂瞳亟±堂僮论塞 行统计学分析，并采用q检验进行组间两两比较，检验其差异性。 1．25kb的PEDF基因片段。免疫印迹(WesternBlotting)结果显示感染 kDa的免疫杂交条带，而 HEK293细胞的Ad．PEDF组得到分子量约为50 癌细胞系SGC7901Western 管内皮细胞的增殖作用，结果显示，与阴性组和对照组相比，Ad．PEDF组 对胃癌细胞系SGC790 1的增殖影响无明显差异，无统计学意义(PO．05)； 统计学意义(PO．01)。 结论：本实验证实了PEDF在体外能够抑制胃癌细胞的生长及转移， 其途径包括：直接阻止胃癌细胞的侵袭、迁移；另一方面通过抑制血管内 皮细胞增殖、侵袭、迁移，从而抑制新生血管生成，间接抑制胃癌的生长 及转移。本研究为胃癌的基因治疗提供了一条新的思路。 关键词：胃癌，色素上皮衍生因子，血管生成，增殖，侵袭迁移 ofthefunctionof factor Theresearch pigmentepithelium·derived