ampC及喹诺酮类靶位基因突变在耐多药大肠埃希菌中的探讨.pdfVIP

． ． 四川医叠一太．堂亟．±．堂僮途塞 一 目 录 1． ampC与喹诺酮类靶位基因突变在耐多药大肠埃希菌中的探讨 1．1中文摘要………………………………………………………1 1．2英文摘要………………………………………………………3 1．4材料与方法……………………………………………………8 1．5结果……………………………………………………………14 1．6讨论……………………………………………………………24 1．7结论……………………………………………………………30 1．8参考文献………………………………………………………31 1．9英汉缩略词对照表……………………………………………35 2 致谢……………………………………………………………37 3 3-内酰胺酶致细菌耐药机制的研究进展(综述) AmpC 万方数据 ampC与喹诺酮类靶位基因突变在耐多药大肠埃希菌中的探讨 摘 要 目的：了解泸州地区大肠埃希菌(Escherichia 及耐喹诺酮类突变靶位基因的情况，并对二者的相关性进行探讨；同时分 析携带突变基因的菌株对喹诺酮类抗菌药物的耐药情况，为临床治疗耐多 药菌株的合理选择抗菌药物提供理论依据。方法：1．PCR技术：使用细菌 基因组DNA提取试剂盒按使用说明提取细菌基因组DNA用作PCR反应模板。 5对引物进行扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，并于254nm波长的紫外 灯下用图像处理器照相。2．基因测序：将PCR产物进行胶回收，回收产物 用核酸定量仪测DNA浓度合格(大于300ng／111)后，送至上海生工技术 公司进行基因测序。3．药物敏感试验：3．1鉴定高产AmpC酶菌株：经过检 测菌株对头孢西丁的抑菌环≤18ram为可疑产AmpC酶菌株，再通过头孢西 丁三维试验方法，通过检测大肠埃希菌的B一内酰胺酶能否水解头孢西丁 突变：选出5种基因电泳均见清晰条带的55株菌株的基因产物进行测序比 万方数据 株(13．11％)。4．药敏结果：(1)实验菌株对亚胺培南敏感性最高，达 100％，其次是头孢西丁、头孢吡肟、氨曲南等抗菌药物，而较低的是部分 喹诺酮类抗菌药物及头孢噻肟、庆大霉素、链霉素等。 (2)ampC基因阳 酶菌株占38．10％。另外，菌株对喹诺酮类药物的交叉耐药现象也比较常见， 耐三种及以上喹诺酮类抗菌药物的菌株有22株(40％)。(4)耐多药菌 株中突变耐药位点与双耐药相比较差距不大，但不同的是出现了ampC阳性 点的突变。结论：1．本地区临床分离的大肠埃希菌中携带ampC基因的菌株 少(11．27％)，但主要分布在耐多药大肠埃希菌中。2．喹诺酮类靶位基因 突变情况在临床分离株中常见，多位点突变以gyrA联合parC基因的突变 变为主。3．ampC基因检出阳性菌株对萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星耐药 性高于ampC基因检出阴性菌株，高产AmpC酶菌株对环丙沙星的耐药率高 于非产An]pC酶菌株。 关键词：大肠埃希菌；多重耐药； ampC／AmpC酶；基因突变／喹诺酮 万方数据 in on and mutation Study geneFluoroquinolonesgene ampC coli Esche：richia TolearnthecaseofEscherichia Abstract：Objective and