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银染： 银染色液中的银离子(Ag )可与核酸形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛 使Ag 还原成银颗粒，可把核酸电泳带染色黑褐色。主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色，也用于琼脂糖凝胶染色。其灵敏度比EB高200倍.但银染色后，DNA不宜回收。 * EB的替代物： GoldView DNA染料是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型DNA染料，使用方法与之完全相同。采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA时，GoldView与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，在某些波段甚至超过EB。在100ml琼脂糖胶溶液中加入5μl GoldView即可，亦可在电泳缓冲液中以同样比例稀释后直接使用。在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光，而单链多聚核酸链呈红色荧光。因此，GoldView不仅能染双链DNA，也可用于染RNA和单链DNA。GoldView DNA染料在不同的波长下灵敏度有一定影响，建议使用312nm波长。 弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭，一般5-10min条带就会消失。 * GeneFinder具有安全、灵敏等突出优点，可以代替溴化乙锭(EB)作为各种核酸电泳的染色剂。 ???? 与强致癌性的EB不同，GeneFinder?属于花青类染料，毒性很低，使用安全,可有效保护实验操作者和环境。 ???? GeneFinder?与dsDNA 结合荧光信号可增强800—1000倍，其检测核酸的灵敏度比EB染色法平均高10倍左右，与美国Molecular Probe公司的SYBR Green I染料的灵敏度相当。GeneFinder?染料最大吸收峰为470nm，与该染料结合的核酸呈现绿色荧光。 * GelRed TM 是美国 Biotium 公最新研制的一种出色的红色荧光核酸染色剂，适用电泳前凝胶染色和电泳后凝胶染色。与 其它核酸染色剂不同，它具备高灵敏度，高稳定性，低毒性和多功能等特性。 这种染色剂不仅有出色的灵敏度，而且表现出高稳定性和广泛的适应 性，可用于电泳前染色 和电泳后染色 。 使用紫外透视器在 300nm 附近可得到最佳激发效果，在 595nm 附近 显示红色发射光谱 。因此，这种染色剂可使用普遍使用的 300nm 紫外透视器得到最佳的激发光谱。 * 与 EB 预制凝胶不同的是， GelRed TM 预制凝胶实质上并没有本底荧光，并且对低分子量的 DNA 片段也具有极高的灵 敏度。 和 EB 一样，使用 GelRed TM 制作的预制胶可以长时间贮存确不会降低性能。而 SYBRGreen 1 和 SYBR Gold 染色剂 却不具备这种特性。当 GelRed TM 用于后制凝胶染色剂时，可以在 30 分钟内完全着色，而且因为没有本底色而免去再进行一次脱色或冲洗 的过程。另外，由于 GelRed TM 的酸碱水解稳定性好，其染色剂可以批量制备以便日后使用。  GelRed TM 的另一个重要特性是它比 EB 更安全，但是价格昂贵。 * 三 凝胶电泳的种类 （一）琼脂糖凝胶 （agarose gel） 琼脂糖是从琼脂（agar)中分离得到，由1，3连接的吡喃型b-D-半乳糖和1，4连接的3，6脱水吡喃型阿a-L-半乳糖组成，形成相对分子量为104～105的长链。琼脂糖加热溶解后分子呈随机线团状分布，当温度降低时链间糖分子上的羟基通过氢键作用相连接，形成孔径结构，而随着琼脂糖浓度不同形成不同大小的孔径。表2-1给出了不同浓度凝胶对DNA片段的线性分离范围。 * 由于琼脂糖凝胶是通过氢键的作用，因此过酸或过碱等破坏氢键形成的方法常用于凝胶的再溶化，象NaClO4能用于凝胶的裂解，一般的凝胶回收试剂盒利用的也是这一原理。 * 随着实验技术的发展，也针对不同用途开发了各种类型的琼脂糖凝胶： （1）低熔点琼脂糖凝胶，用于DNA片段的回收，且由于该种凝胶中无抑制酶，可在胶中进行酶切、连接等；（2）高熔点凝胶，可分离小于1kb的DNA片段，专用于PCR产物的分析； （3）快速凝胶，电泳速度比普通凝胶中快一倍，可节省实验时间； （4）适用于DNA大片段的分离。 （5）其它类型。各生产商还开发很多类型的凝胶，可根据实验要求选择不同类型的，选择原则是考虑合适的机械强度和熔点。 * * （二）聚丙烯胺凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）宜分离鉴定低分子量蛋白质、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分 析.其装载的样品量大，回收DNA纯度高.长度仅相差0.2%(即500bp中的1bp)的核苷酸 分子即能分离。 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯