SV40T抗原基因的稳定转染和对人胃癌细胞SGC7901的生物学效应.pdf

授 予单位代码 : 1 0 4 5 9 学号或 申请号 : 0 5 3 1 19 9 3 密 级 : 公 开 士郑 州学 位大 论学 硕 文 论 文 题 目: SV 40 T 抗 原基 因 的稳 定转 染及 对 人 胃癌 细胞 SG C 7901 的生物 学效应 作 者 姓 名 : 马 慧 洁 学 科 门 类 : 矢{ 学 专 业 名 称 : 人 体 解 fJtl 与 组 织 胚 胎 学 张钦 宪 教授 一导师姓名 、职称 : 二 零 零 八 年 五 月 SV 40 T 抗 原基 因 的稳 定 转 染及 对 人 胃癌 细胞 SG C 7901 的生物 学效应 研 究生 马慧洁 导 师 张钦 宪 郑 州 大 学 医学 院组 织胚 胎 学 教 研 室 郑 州 4500 52 摘 要 猴病 毒40 (Sim ian virus40 ，SV 40)是 一种D N A 肿瘤 病 毒 ，在 体 外可 以转 化 细 胞 并诱 发动物 体 内产 生肿 瘤 ，在 人类 多种肿瘤 中 己检测 到SV 40 基 因 的存 在 和表 达 。SV 40与 人类 肿 瘤 关 系密切 ，它 的致瘤 性 和 转 化 细 胞 能力主要 与其 编 码 的早 期 蛋 白T抗 原 (T an tigen ，Ta g)有 关 。sv 40 Ta g 能够 和 抑 癌 蛋 白P5 3和 R b 等 结合 并 使 之 失 活 ，导 致 细 胞 生 长 失控 和 恶 性 增 殖 ，被 认 为 是 SV 40Ta g致 瘤 发 生 的重 要 机 制 。sv 4oTa g可 以整 合 入 细 胞 基 因组 中破 坏 其 结 构 和 稳 定 性 ，反 式 激 活 细 胞 基 因 的表达 并启动 宿 主DN A 的复制 转录等 。SV 40T ag对 细 胞转化起 决 定性 作用 ， 与细胞 增 殖 及 肿 瘤 发 生密切 相 关 ，它 可 以诱 发转 基 因动物产 生 多种 类 型肿 瘤 ， 被 广 泛 用 于肿 瘤 发 生机 制 的研 究 。 利 用 sv 40Ta g基 因与 组 织 表 达 特 异 性 的启 动 子 相 结合 ， 己经 成 功 制 备 多种 转 基 因 小 鼠肿 瘤 模 型 。H +/K +AT P ase基 因在 胃壁 细 胞 中特 异 性 表 达 ，利 用 胃壁 细 胞 特 异 性 H +/K+ AT P ase p亚 基 启 动 子 建 立 sv 40 Ta g基 因转 基 因小 鼠 胃癌 模 型 ，可 用 于 胃癌 发 病 机 制 的研 究 ， 同时为 胃癌 的预 防和 治疗 提 供 有 力 的工 具 。 在 以往 研 究 的 基 础 上 ，本 实 验 将 H 勺K+ AT Pa se p 亚 基 启 动 子 驱 动 表 达 sv 4 o几 g基 因 的真 核 表 达 载 体 p eD N A 3.lC )/H K sv 转 染 入 SG C 790 1、E C 9706 和 K B 细 胞 中 ，通 过 G 4 18筛 选 和 扩 大 培 养 ，获 得 稳 定 转 染 的细 胞 系 。