TLR4NF-κB和其炎性因子IL-1β在大鼠创伤性脑损伤中的表达.pdf

摘 要 TLR4 ／NF- κB 及其炎性因子IL-1 β 在大鼠创伤性脑损伤中的表达 研究生 唐芳芳 导 师 张广政 郑州大学基础医学院法医学教研室 河南郑州 450001 摘 要 背景与目的 创伤性脑损伤 （Traumatic brain injury ，TBI)是世界上造成人类高死亡率 和高致残率的重要因素之一，尤其是在儿童和年轻人中，给家庭和整个社会带 来了严重的心理问题和经济负担。TBI是一种由于外部机械力对大脑造成的损害， 脑外伤幸存者可遗留下短暂或永久的认知功能障碍及其他生理功能的损伤，并 产生一系列的心理疾病。它是由原发性损伤和继发性损伤共同作用的高度复杂 的疾病。 大量研究结果表明，创伤性脑损伤后的继发性损伤，是在原发性损伤造成 伤害的基础上对机体造成了进一步的损伤，决定着脑损伤病人的预后和结果。 而由于继发性损伤具有一定的延迟性，也可为防止组织的进一步损伤及改善损 伤后的功能恢复提供一个治疗的时间窗。众多的临床和实验研究结果表明，创 伤性脑损伤在大脑引起的炎症和免疫反应在创伤性脑损伤后的继发性脑损伤中 扮演着关键角色。其中，Toll样受体家族（toll like receptors, TLRs ）所介导的信 号通路在脑损伤过程中尤其重要，Toll样受体家族中的TLR4在TBI后启动炎症反 应中起着重要的作用。 I 万方数据 摘 要 TLR4信号转导通路主要是激活转录因子IRF3来调节相应的基因转录和髓样 分化因子88衔接蛋白依赖性途径，通过与髓样分化因子88衔接蛋白的相互作用 激活下游核转录因子（nuclear factor κB , NF- κB ），并引起促炎细胞因子和神经 毒性的后续生产。TLR4信号转导通路还可以通过髓样分化因子88的激活和相应 的下游效应因子使NF- κB 的抑制因子IκB磷酸化，从而使NF- κB活化，启动相 应的基因转录。NF- κB是最重要的转录因子之一，具有多向性转录激活功能， 参与了炎症反应、免疫反应、细胞凋亡等许多生理病理过程。当组织细胞受到 外界病理性刺激，TLR4通过信号传递激活NF- κB并使其发生移位，从而导致 TLR4 ／NF- κB信号通路下游的许多炎性因子如IL-1 β、MCP-1、IL-6、TNF-α、 趋化因子等的分泌。我们复制了经典feeney’s 自由落体损伤模型，并利用该模型 观察脑损伤后大鼠脑组织的病理变化，检测TLR4 ／NF- κB及其炎性因子IL-1 β 在创伤性脑损伤中不同时间表达的变化规律，进一步阐明三者在脑挫裂伤后病 理生理变化的作用，为临床治疗和法医鉴定提供理论基础。 方法 成年健康清洁级SD(Sprague-Dawley)大鼠72只，雌雄不限，体重250-300g， 由郑州大学实验动物中心提供。所有动物随机分为两组：假手术组12只（免疫 组化组和RT-PCR组各6只）仅做常规麻醉开颅，不做颅脑打击；脑损伤组60只， 仿制经典feeney’s 自由落体损伤模型后分别于第3h、6h、12h、1d、3d和7d各随机 选取10只，进行大鼠脑损伤后的行为学观察，并对损伤组大鼠进行神经功能损 伤评分后随机分为两组，分别用免疫组化和RT-PCR技术检测TLR4 、NF-κB及其