光化学制备用于链亲和素固定的胺基磁性纳米凝胶的研究 photochemical preparation of amino-functionalized magnetic nanogels for immobilization of streptavidin.pdfVIP

第 24 卷 第 6 期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vol.24, No.6 2006 年 12 月 J. Radiat. Res. Radiat. Process. December 2006 光化学制备用于链亲和素固定的胺基磁性纳米凝胶的研究 宫培军 1,3 洪 军 1,3 刘兴奋 1,3 余家会 2 樊春海 1 董 黎 1,3 姚思德 1 1 （中国科学院上海应用物理研究所上海 201800 ） 2 （华东师范大学信息学院生物工程材料与器件研究所上海 200062 ） 3 （中国科学院研究生院北京 100049 ） 摘要 本工作提出制备胺基磁性纳米凝胶的一种改进方法。在含有烯丙基胺的 Fe O 水分散液中，运用紫外光 3 4 辐照引发烯丙基胺原位聚合，一步法制备了聚烯丙基胺磁性纳米凝胶（Polyallylamine magnetic nanogels ， PAA-MNGs ）。透射电子显微镜（Transmission electron microscope，TEM ）和光子相关光谱（Photo correlation spectroscope，PCS ）表征了PAA-MNG 的形貌和粒径分布；热重分析（Thermogravimetric analysis，TGA ）确 定了磁性成分的含量，振动样品磁强计（Vibrating sample magnetometer ，VSM ）测试表明其呈现超顺磁性。 利用表面的伯胺基，PAA-MNGs 可以方便地偶联蛋白等生物大分子。链亲和素（Streptavidin，SA）经 1-乙基 3- （3-二甲氨基）碳化二亚胺盐酸盐和 N-羟基琥珀酰亚胺活化后可以共价固定在 PAA-MNGs 上，得到链亲和 素包覆的纳米磁球 （Streptavidin-coated magnetic nanoparticles，SA-MNPs）。使用探针生物素对硝基苯酯 （Biotin p-nitrophenyl ester ，BNPE ）通过光谱检测证实了SA-MNPs 的生物素结合能力。表明PAA-MNGs 适合于作为 载体偶联蛋白等生物大分子，并可能用于生物技术领域的诸多方面。 关键词 聚烯丙基胺，磁性纳米凝胶，紫外辐照，链亲和素 中图分类号 O644.14 ，O631.3+ + 2 ，O614.81 1 近年来高选择性磁分离技术广泛被研究并用 关研究备受关注。已有多种方法可制备合适的磁珠， 于生物技术、生物医学诊断及环境分析等领域。这 如包埋法、乳液聚合法、辐射聚合等[9-11] 。然而， 一技术系将某亲和试剂固定于事先制成的磁珠表 这些磁珠的比表面积小、粒径分布较宽，也可能含 面，用于分离与富集生物大分子、微组织以及细胞 有未能完全去除的添加剂，使其在某些生物技术领 等[1-5] 。该亲和试剂与被分离物质能特异性结合， 域的应用受到限制。我们曾提出紫外光辐照法制备 所以该方法具有很高的选择性。例如，利用抗体为 纳米磁珠，将 Fe3O4 纳米粒子分散在单体和交联剂 媒介分离细胞是磁珠最为广泛的实际应用之一[3,6] 。 的水溶液中，运用紫外光引发单体和交联剂原位聚 亲和素/链亲和素对生物素的结合作用，在自然界 合，可制备表面带有不同官能团、壳层具有很大溶 中蛋白与配体已知相互作用中最强（解离常数