肥大细胞对重组口蹄疫病毒VP1-VP4应答的蛋白质表达谱检测.PDF

1194 生 物 工 程 学 报 王燕 等/肥大细胞对重组口蹄疫病毒VP1-VP4 应答的蛋白质表达谱检测 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn September 25, 2016, 32(9): 1194−1203 DOI: 10.13345/j.cjb.150533 ©2016 Chin J Biotech, All rights reserved 动物及兽医生物技术 VP1-VP4 王燕，张莎莎，王蕾，刘雪芳，张恩，李娜，高云欢，张义明，李丽敏，王家鑫 071000 , , , . VP1-VP4 . , 2016, 32(9): 1194–1203. Wang Y, Zhang SS, Wang L, et al. Protein expression profile of mast cells in response to recombinant VP1-VP4 of foot-and-mouth disease virus. Chin J Biotech, 2016, 32(9): 1194–1203. 摘 要: 为揭示肥大细胞抗口蹄疫病毒VP1-VP4 蛋白的天然免疫作用，以重组口蹄疫病毒VP1-VP4 蛋白刺激 小鼠腹腔肥大细胞 (Peritoneal mast cells, PMCs) ，用高通量ELISA 芯片检测PMCs 的蛋白质表达谱。结果显示， VP1-VP4 蛋白刺激的 PMCs (VP1-VP4 组) 表达 CCL19 、L-selectin 、CCL17 和TNF-α 的水平极显著低于对照 组 (PMCs) (P0.001) ，而VP1-VP4 蛋白刺激经甘露糖受体 (Mannose receptor, MR) 抑制剂预处理的PMCs (MR 组) 表达CCL19 、IL-15 、IL-9 、G-CSF 和Galectin-1 的水平则极显著高于对照组 (P0.01) ，IL-10 表达水平也 有显著升高 (P0.05) 。MR 组与VP1-VP4 组相比，PMCs 表达IL-10 、IL-17 、CCL20 、IL-15 、IL-9 、L-selectin 、 CCL17 、TNF-α 和 CCL19 的水平极显著升高 (P0.01) ，CCL21 和 G-CSF 的表达也显著高于 VP1-VP4 组 (P0.05) 。生物信息学差异表达分析结果显示，与对照组相比，VP1-VP4 组PMCs 表达的L-selectin 和CCL17 为下调性差异表达蛋白 (Log2 (ratio)≤–1) 。MR 组与VP1-VP4 相比，PMCs 表达的CCL20 、CCL19 、L-selectin 和 IL-15 为上调性差异表达蛋白 (Log2 (ratio) ≥1)。这表明，PMCs 可自发分泌 CCL19 、L-selectin 、CCL17 和 TNF-α，而VP1-VP4 则对PMCs 的天然免疫功能具有抑制作用。由于阻断MR 后 PMCs 的蛋白质表达水平显 著升高，所以VP1-VP4 对小鼠PMCs 的免疫抑制作用可能是由MR 介导的。 : 肥大细胞，甘露糖受体，口蹄疫病毒，天然免疫，差异表达 Received: December 15, 2015; Accepted: April 15, 2016 Supported by: National Natural Science Foundation of China (No., Comprehensive Reform Project of Veterinar