环氧化酶-2(COX-2)抑制剂筛选试剂盒.PDFVIP

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环氧化酶-2(COX-2)抑制剂筛选试剂盒.PDF

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :order@ 技术咨询:info@ 碧云天网站 微信公众号 网址: 环氧化酶-2(COX-2)抑制剂筛选试剂盒 产品编号 产品名称 包装 S0168 环氧化酶-2(COX-2)抑制剂筛选试剂盒 100次 产品简介:  碧云天研发的环氧化酶-2(COX-2)抑制剂筛选试剂盒(Cyclooxygenase 2 Inhibitor Screening Kit ,也称COX-2 Inhibitor Screening Kit)是一种利用荧光检测,简单、快速、灵敏地用于人COX-2抑制剂高通量筛选的试剂盒。  环氧化酶(cyclooxygenase, COX)又称前列腺素内氧化酶合成酶(Prostaglandin-endoperoxide synthase, PTGS) ,是一种同时具有 环氧化酶和过氧化氢酶活性的双功能酶。例如,COX 的环氧化酶活性可以催化花生四烯(Arachidonic Acid, AA)转化为前列腺 素G2(prostaglandin G2, PGG2) ,而COX 的过氧化氢酶活性又可以将前列腺素G2转化为前列腺素H2(prostaglandin H2, PGH2) 。  有两种常见的COX,一种是组成性表达的COX-1,另一种是诱导性表达的COX-2 。哺乳动物的COX-1与COX-2 的分子量相似, 分别是70和72KDa,其氨基酸序列有65% 同源,其中酶催化活性区域的氨基酸序列几乎一致。COX-1在很多组织中组成性表 达,在胃粘膜、肾脏等中高表达,催化产生维持正常生理功能的前列腺素,从而参与血管舒缩、血小板聚集、胃粘膜血流、 胃黏液分泌及肾脏功能等的调节。COX-2在正常生理状态下几乎不表达或表达很少,仅在脑、肾脏和生殖器官等中有一定水 平的组成性表达。COX-2在巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和单核细胞等发生炎症反应时,可以被诱导表达。例如受炎性 刺激物、损伤、有丝分裂原或致癌物质等促炎介质诱导后,COX-2 的表达增高,从而参与多种病理生理过程。COX-3是COX-1 的不同剪接体,和COX-1相比,COX-3多保留了一个内含子,在狗(dog) 中该内含子的长度为93个碱基,而在人和小鼠中长度 为94个碱基,因此在狗中COX-3是有酶活性的,而人和小鼠中的COX-3 由于移码突变而没有酶活性。  COX-2与炎症和肿瘤等的发生发展密切相关。因此,COX-2 的选择性抑制剂成为药物研究的一个热点。1991年1月第一个真 正意义上的COX-2选择性抑制剂塞来昔布(Celecoxib)经美国FDA批准上市,同年5月第二个选择性抑制剂罗非昔布(Rofecoxib) 也在欧洲上市。这些COX-2抑制剂药物成功上市,为后续COX-2选择性抑制剂的研究和发展开辟了广阔道路。如今在临床上 COX-2选择性抑制剂已经被广泛用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、牙痛、手术后疼痛以及肿瘤等疾病。  本试剂盒的检测的基本原理参考图1。在辅助因子(Cofactor)存在的情况下,COX-2使用其环氧化酶(COX)活性把花生四烯酸 (Arachidonic Acid)等底物环氧化生成PGG2等中间产物,继而COX-2使用其过氧化物酶(peroxidase)活性把PGG2等中间产物催 化生成PGH2等最终产物,同时把几乎没有荧光的COX-2探针(Probe)催化生成有强荧光的探针(Ex560/Em590) 。这样通过荧光 检测就可以非常灵敏地检测COX-2 的酶活性。如果在反应中加入COX-2抑制剂(Inhibitor),荧光的生成就

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