急性出血性结膜炎病原检测.ppt

急性出血性结膜炎 病 原 的 种 类 AHC是一种急性病毒性眼科疾病。自1969年加纳首先报告该病，其后迅速向世界各地蔓延，引起世界3次大流行。 引起AHC流行的主要病原是CA24V和EV70，但某些肠道病毒及某些腺病毒也可导致该病，须经实验室诊断才能确诊。 1988年北京、上海、广州和武汉等地暴发AHC大流行，分离出25株病毒，经鉴定为CA24v，为中国大陆首次报道由CA24v引起的AHC流行 病 原 检 测 方 法 2002年福建省急性出血性结膜炎病原分离和鉴定 取患者眼拭子接种于Hep2和Vero细胞，对标本进行病原分离，细胞病变达+++时收获。 用诊断血清（CA24V和EV70）分别在微量板上所分离株病毒进行中和试验。 对患者的双份血清进行中和抗体效价测定。用经上述诊断血清鉴定的4株CA24V分离株病毒，在微量板上测定患者双份血清中和抗体效价。 结果显示：恢复期血清中和抗体效价均比急性期呈≥4倍增长，确认引起流行的病原为CA24V 。 1994年北京AHC病原学检查 1994北京AHC流行，从协和医院眼科门诊收集的急性期病人的眼拭子，经免疫血清中和试验表明分离的病毒全为CA24V。 北京市自1988年首次从急性期患者分离到CoxA24病毒至今，流行毒株一直是CoxA24变异株。除1994年AHC中度流行以外，1991年以来的其它年份没有暴发疫情，AHC处于稳定的散发或偶尔多发状态。 与1988年分离的病毒制备的单克隆抗体，作免疫荧光中和试验，表明1994年分离的病毒株已缺失一个中和抗原决定簇；另2个中和抗原已有量的变异。 有研究曾用单抗对世界不同年代及我国不同地区分离的CA24型病毒株作抗原分析，发现引起AHC的CA24变异株与CA24原型株的抗原性，尤其是中和抗原截然不同，而且CA24变异株的中和抗原也仍继续变异中。 再次证明1994年CA24V分离病毒株与1988年分离病毒株已有抗原差异，提示引起AHC的病毒型别交替和病毒抗原变异是AHC反复出现流行的一个重要原因。 1988、1990年在山东济南流行中病原学研究 标本收集：严格选择2天内患者，常规方法采取眼拭子-20C0冰箱保存。 诊断血清：EV70，柯萨奇病毒24参考株及分离阳性株免疫血清，腺病毒3（Ad3），8（Ad8），11（Ad11）型免疫血清。 病毒分离及鉴定：选用Hela，MEK, MK细胞。鉴定方法有： 微量法：分别与各种诊断血清做中和试验。 间接免疫荧光试验：将阳性标本接种Hela细胞，常规法作间接免疫荧光试验。 病毒理化特性试验 血清中和抗体测定 结果：1988年流行病原是柯萨奇病毒A24变异株。1990年标本电镜观察形态为腺病毒，经抗血清鉴定可被Ad11型中和，提示由腺病毒11型引起。 病 原 测 定 1986年福州市发生AHC流行，从患者体中分离出CA24V 。 2002年8至9月，福州、漳州、厦门等地也相继发生AHC流行。引起此次福建省AHC流行主要病原为CA24V 。 其 他 地 区 病 原 检 测 1988年和1994年保定流行AHC，经检测证实两次均由CA24变种引起，两次流行病原体相同，间隔6年。 汕头1994年AHC流行，从2例患者标本中检出CA24V型，此次流行可能与CA24V型病毒有关。而1993和1995年散发病例中检出的病毒有EV70型，Adv3、11型，CVB5型，还有CA24V型。 1994年辽宁省6城市AHC流行，经鉴定均为CA24V感染。 1994年青岛市流行的AHC的主要病毒同1988年全国范围内流行的病毒血清型相同，分离的病毒株为CA24V 。 1984年北京报道由EV70引起的AHC流行。 为了解AHC的腺病毒病原及腺病毒基因型，1994-1996年北京联合青岛研究99例AHC中指出，研究AHC病毒病原时宜用2种以上细胞分离病毒。 同时发现AHC患者中分离出Ad3属基因11型，有别于引起呼吸道感染的Ad3 I型。 结 论 从多次AHC流行分析推测，CA24V引起的流行主要在东南亚国家及印度；同时 CA24V也是我国ＡＨＣ报道中流行的主要病原。CA24V比EV70引起的流行更具有爆发性，传播更为广泛。 某些型的腺病毒亦可引起AHC在一定范围的流行。 单从临床表现无法区分病原，即使同一种病毒引起的AHC流行，临床表现亦有差异。 人体对CA24V的免疫不持久，患者体内的抗体水平维持时间似不长，在患病两年之后抗体大部分已不能测到，可能和大多数AHC为局部感染有关。 正常人群中CA24V抗体水平不高，几年之后有可能再次出现AHC的流行，故应积极做好预防工作。 结 论 在AHC流行时应采用多种分离系统