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大黄鱼(pseudosiaena crocea)冻精dna损伤检测.pdf 7页

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大黄鱼(pseudosiaena crocea)冻精dna损伤检测
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动 物 学 研 究 2009 ,Apr. 30(2): 151−157 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI :10.3724/SP.J.1141.2009.02151 黑鲷精子的超低温冻存及 DNA 损伤的 SCGE 检测 1 1, * 2 1 3 叶 霆 ,竺俊全 ,杨万喜 ,魏 平 ,吴雄飞 (1. 宁波大学 教育部应用海洋生物技术重点实验室,浙江 宁波 315211 ;2. 浙江大学 生命科学学院,浙江 杭州 310012 ; 3. 宁波市海洋与渔业研究院,浙江 宁波 315012 ) 摘要:以0.5mL 的麦细管为冻存管和DMSO 为抗冻剂进行超低温冷冻黑鲷精子,对冻精核DNA 的损伤情况 进行单细胞凝胶电泳(SCGE )检测,其结果表明,以Cortland 溶液为稀释液,5%、10%、15%及20%DMSO 为 抗冻剂的超低温冻存的黑鲷精子活力、受精率与鲜精无显著差异。其中以10%DMSO 为抗冻剂的冻存效果最佳, 冻精的激活率、运动时间、寿命及受精率分别达(92.91±1.25 )%、(39.90±2.70 )min 、(53.82±2.84 )min 及(89.35±1.99 ) % ;而以25%及30%DMSO 为抗冻剂时,冻精活力及受精率显著下降。SCGE 检测结果显示,DMSO 浓度为5%、 10%、15%及20% 时,黑鲷冻精与鲜精的彗星率及损伤系数差异不显著;DMSO 浓度为25%及30%时,冻精与鲜 精的彗星率及损伤系数差异显著;冻精的彗星率与抗冻剂DMSO 浓度成正相关。黑鲷鲜精及冻精核的DNA 损伤 主要为轻度和中度损伤,重度损伤比例较低,完全损伤仅存在于25%及30%DMSO 为抗冻剂的冻精中,且比例低。 分析认为,较高浓度的DMSO 是引起冻精核DNA 损伤的主要原因。 关键词:黑鲷;精子;超低温冻存;精子活力;受精率;DNA 损伤;单细胞凝胶电泳 中图分类号:Q959.483 ;Q492 文献标识码:A 文章编号:0254-5853-(2009)02-0151-07 Sperm Cryopreservation in Sparus macrocephalus and DNA Damage Detection with SCGE 1 1, * 2 1 3 YE Ting , ZHU Jun-quan , YANG Wan-xi , WEI Pin , WU Xiong-fei (1. Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology by the Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China; 2. College of Life Science, Zhejiang University, Hangzhou 310012, China; 3. Ningbo Academy of Oceanology and Fisheries, Ningbo 315012, China) Abstract: In this paper, DMSO

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