第八章遗传变异和育种_第一节遗传变异的物质基础.ppt

第八章 微生物的遗传变异和育种 第一节 遗传变异的物质基础 7. 核苷酸水平 腺苷酸（AMP） 胸苷酸（TMP） 鸟苷酸（GMP） 胞苷酸（CMP） 5－羟甲基胞嘧啶（稀有碱基） ① 每个碱基对（bp）的平均相对分子质量约为650； ② 1×106的dsDNA约为1.5kb（千碱基对）或0.5mm （长度）； ③ 3nmol碱基的重量约等于1 mg。 （二）原核生物的质粒 1. 定义和特点 质粒： 凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子，即cccDNA，就是典型的质粒。 另一类质粒的复制与核染色体的复制不同步， 在这类细胞中，一般含10～15个或更多质粒。 严紧型复制控制（stringent replication control） 松弛型复制控制（relaxed replication control） 质粒的复制与核染色体的复制同步， 在这类细胞中，一般只含1～2个质粒； 质粒是一种独立存在于细胞内的复制子（replicon）。 通常以共价闭合环状（covalently closed circle，简称CCC）的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中； 也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒； 质粒分子的大小范围从1kb左右到1000kb； （细菌质粒多在10kb以内） 2. 质粒的分子结构 * * 遗传（heredity inheritance） ： 亲代与子代相似 变异（variation） ： 亲代与子代、子代间不同个体不完全相同 遗传（inheritance）和变异（variation） 是生命的最本质特性之一 （1）遗传型（genotype） 生物的全部遗传因子及基因 又称基因型，指某一生物个体所含有的全部遗传因子即基因组（genome）所携带的遗传信息。遗传型是一种内在可能性或潜力，其实质是遗传物质上所负载的特定遗传信息。 （2）表型（phenotype） 具有一定遗传型的个体，在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的形态等生物学特征的总和。 又称表现型，指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和，是其遗传型在合适环境下通过代谢和发育而得到的具体表现。 表型是由遗传型所决定，但也和环境有关。 （3）变异 遗传型变异（基因变异、基因突变）： 指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变，亦即遗传型的改变。 遗传物质改变，导致表型改变 特点：群体中极少数个体的行为 （自发突变频率通常为10-6-10-9） 性状变化幅度大 新性状可遗传 表型饰变： 指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。 表型的差异只与环境有关 特点：暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为 橘生淮南则为橘，生于淮北则为枳。 （4）饰变（modification） 微生物是遗传学研究中的明星： 微生物细胞结构简单，营养体一般为单倍体，方便建立纯系。 很多常见微生物都易于人工培养，快速、大量生长繁殖。 对环境因素的作用敏感，易于获得各类突变株，操作性强。 一、3个经典实验 （一）经典转化试验 最早进行转化（transformation）实验的是F. Griffith（1928年），他以Streptococcus pneumoniae （肺炎链球菌，旧称“肺炎双球菌”）作为研究对象。 （1）动物实验 著名的肺炎球菌转化试验 S型，致病菌， 具荚膜，菌落表面光滑（smoth） R型，非致病菌， 无荚膜，菌落表面粗糙（rough） S型 R型 加热灭菌 热死S菌＋活R菌 （2）细菌培养试验 （3）S型菌的无细胞抽提液试验 Avery在四十年代以更精密的实验设计重复了以上实验 （1）从活的S菌中抽提各种细胞成分（DNA，蛋白质，荚膜多糖等） （2）对各组分进行转化试验 只有DNA被酶降解破坏的抽提物无转化活性 DNA是转化所必需的转化因子 （二）噬菌体感染实验 1952年，A.D.Hershey和M.Chase发表了证明DNA是噬菌体的遗传物质基础的著名实验 ——噬菌体感染实验 35S－蛋白质外壳的噬菌体 32P－DNA核心的噬菌体 在DNA中存在着包括合成蛋白质外壳在内的整套遗传信息。 （三）植物病毒的重建实验 为了证明核酸是遗传物质，H. Fraenkel-Conrat（1956）用含RNA的烟草花叶病毒（TMV）进行了著名的植物病毒重建实验。 烟草花叶病毒的核酸 抗血清处理，证明杂种病毒的蛋白质外壳来自病毒1，而非病毒2 杂种病毒的后代的蛋白质外壳表现为病毒2，而非病毒1 遗传物质是核酸（RNA）而非蛋白质 霍氏车前病毒 的蛋白质外壳 HRV TMV 二、遗传