奉晚与奉节72-1脐橙的蔗糖代谢相关酶基因表达.pdfVIP

奉晚与奉节 72-1 脐橙的蔗糖代谢相关酶基因表达 及其在糖分差异中的作用1 12 2 12 3 12* 刘永忠 唐鹏 熊晶晶 向可术 邓秀新 1 (华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室， 2华中农业大学园艺林学学院，武汉，430070, 3奉节县农业局，重庆，404600) *通讯作者e-mail ：xxdeng@ 摘 要:本文采用 RT-PCR 技术分析了果实成熟过程中两个品种可食部位蔗糖代谢相关酶的表达状况，同时 测定了对应时期它们的糖组分含量变化，结果表明在果实成熟过程中酸性转化酶 （AI）基因在奉节 72-1 脐橙和奉晚脐橙间出现表达差异，而蔗糖合成酶 （SS）基因都能够检测到的表达，但是都没有检测蔗糖磷 酸合成酶 （SPS）基因的表达。分析对应时期两个品种的各糖组分 （包括蔗糖、葡萄糖和果糖）变化发现， 奉节 72-1 脐橙果实的蔗糖积累在 11 月份就达到较高水平，葡萄糖和果糖含量在 12 月中旬达到最高水平， 然后在果实挂树后期各糖组分表现下降趋势。而奉晚脐橙的各糖组分在果实成熟过程中一直保持上升趋 势，各糖组分在元月份前的成熟过程中多数情况都显著低于对照品种的各糖组分含量。因此 AI 表达差异 可能是造成奉晚脐橙与奉节 72-1 脐橙糖分差异的主要原因之一。 关键词：脐橙；晚熟芽变；蔗糖代谢酶；RT-PCR 植物组织中糖分的含量不仅受到环境因素的影响，在体内还受到蔗糖代谢相关酶的协调调控。有关糖 分代谢直接相关的酶包括蔗糖磷酸合成酶（Sucrose phosphate synthase, SPS），蔗糖合成酶（Sucrose synthase, SS）和转化酶 （Invertase）。转化酶因其存在部位和对PH值的要求不同可以分为中性转化酶， 细胞壁转化酶和酸性转化酶（AI）[1] 。Sturm等(1999)认为与蔗糖降解相关的酶对植物的生长发育和碳素分 配起到关键作用[2] 。对柑橘果实糖分和相关代谢酶的活性关系研究表明相关代谢酶在果实发育过程中糖分 积累起到重要作用[3-7] 。现在普遍认为糖分在果实中的分配和积累状况不仅直接影响果实品质，而且在植物 生长和发育过程中起到信号分子的作用，与激素等对许多基因的表达和发育过程起着重要的调控作用[1， 8-10] 。 由于多数作物缺少适合的突变体材料，有关糖分在调控基因表达和生长发育过程的相关信息主要来自 于与对拟南芥菜和番茄相关糖分和激素突变体的研究[8，9] 。1995 年在重庆市奉节县奉节 72-1 脐橙果园中发 现了一个晚熟芽变材料，经过多年多点嫁接试验证明该芽变性状稳定，2005 年审定为奉晚脐橙。研究结果 表明该芽变品种不仅表现着色推迟，而且果实的内在品质 （如可溶性固形物）也发生了变化[11] 。另外近来 有关糖代谢相关酶的基因已经柑橘作物上克隆，并在GenBank 中公布（SPS，AB005023 ；SS，AB025778， AB022091；AI ，AB074885 ），使研究蔗糖相关代谢的基因表达成为可能。本研究以奉节 72-1 脐橙为对照， 对奉晚脐橙在果实成熟过程中蔗糖代谢相关酶的基因表达进行了分析，并分析了对应时期糖组分的含量， 对导致奉晚脐橙糖分差异的原因作了初步探讨。 1 材料与方法 基金资助项目：教育部博士点基金资助(20020504015), 国家自然科学基金），863计划（2001AA241141 ） - 1 - 1.1 材料及样品处理 奉晚脐橙(Citrus sinensis L.Osbeck)来自于奉节县生产果园，并在晚熟芽变单株旁边选择一棵树势相当的奉 节 72-1 脐