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微生物学实验技术考试大纲 一、指导思想 ? 检查学生对微生物学基本实验技术的掌握和运用的熟练程度，督促学生复习和巩固实验技能，为进一步学习专业课和从事微生物科研、教学和生产打下扎实的实验基本功。? 二、考试方式 ??? 实际操作 三、考试范围 1、?????? 三大类群微生物细菌、放线菌和霉菌的制片观察技术； 2、?????? 微生物细胞的大小测定； 3、?????? 微生物细胞的显微计数。 四、评分批准（附后） ? ? ? ? ? ? 第一题 细菌革兰氏染色? 评分标准 类别 项目 分值 标准 扣分 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1 点酒精灯 5 取火柴等点燃酒精灯。灯帽倒扣在桌上。 灯帽乱扔扣2分，火柴棒乱丢扣2分 2 取载玻片 5 从广口瓶中取出载玻片，盖上瓶盖，烧去片上的酒精。 不盖瓶盖者扣2分， 在灯上长时间烧片扣2分 3 加蒸馏水 5 取一滴蒸馏水滴加在载玻片的中央。 取量太多者扣1分 4 5 取菌 涂片 10 一手拿试管，一手拿接种环，拔取棉塞，接种环经火焰灭菌后，伸入管内，冷却后，开始取一环菌。塞上棉塞。 将所取菌均匀涂成一薄层后，将接种环灭菌后放于盒中。 棉塞放于桌子上者扣5分。接种环不灭菌取菌者扣5分。接种环灭菌后不冷却直接取菌者取5分。不在无菌圈内进行操作者扣5分。 根据所涂片质量酌情扣分。接种环不灭菌放入盒中，扣1分。乱扔于桌子上扣1分。 6 干燥 5 风干或在酒精灯上方烤干 若离酒精灯太近进行干燥者扣2分 7 固定 5 将干燥后的载玻片在酒精灯火焰上固定3次，每次1-2秒。 若涂片面朝下在酒精灯上进行固定者扣5分。 8 初染 5 加结晶紫覆盖涂片，进行初染1分种，水洗 视情况酌情扣分 9 媒染 5 加碘液媒染1分钟，水洗 视情况酌情扣分 10 脱色 5 用95%的酒精脱色30秒，水洗 视情况酌情扣分 11 复染 5 用番红复染1分钟，水洗 视情况酌情扣分 12 干燥 5 风干或在酒精灯上方烤干或用吸水纸吸干 用吸水纸吸干时若有搓动者，扣2分；在火焰上干燥时，离火焰太近者扣2分 13 镜检 10 先用低倍镜，后用高倍镜，再加香柏油，用油浸镜观察。也可直接用油镜进行观察 拿低倍镜或高倍镜当油镜用时，扣5分，转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。 14 结果 15 正确者得全分 不正确者该项不得分 15 显微镜 保养 15 ?擦去香柏油→沾二甲苯擦→擦去二甲苯（重复3次），加罩衣，登记 每缺1步扣5分 →注：每超1分钟扣1分 第二题 霉菌制片观察? 评分标准 类别 项目 分值 标准 扣分 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1 点酒精灯 5 取火柴等点燃酒精灯。灯帽倒扣在桌上。 灯帽乱扔扣2分，火柴棒乱丢扣2分 2 取载玻片 5 从广口瓶中取出载玻片，盖上瓶盖，烧去片上的酒精。 不盖瓶盖者扣2分， 在灯上长时间烧片扣2分 3 4 加棉兰 取菌 40 在载玻片的中央滴加一滴棉兰。 一手拿平板，一手拿接种针，接种针经火焰灭菌后，伸入平板内，冷却后，开始取菌。根霉挑取菌丝即可。青霉和曲霉需带一点培养基出来。将接种环灭菌后放于盒中。 平板拿法不规范者扣5分。接种针不灭菌取菌者扣5分。接种针灭菌后不冷却直接取菌者取5分。不在无菌圈内进行操作者扣5分。取菌不符合规定者，扣5分。接种针不灭菌放入盒中，扣3分。乱扔于桌子上扣3分 5 加盖玻片 5 取菌后，用镊子或手取一盖玻片，盖上盖玻片。 盖玻片下有气泡扣1分 6 镜检 20 用低倍镜或高倍镜观察。 转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。 7 结果 15 正确者得全分（结合显微镜判断） 不正确者该项不得分 缺1个特征扣5分。 8 显微镜 保养 10 加罩衣，登记 每缺1步扣5分 注：每超1分钟扣1分 第三题 微生物细胞大小测定? 评分标准 类别 项目 分值 标准 扣分 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1 校正 30 显微镜使用符合标准 低倍镜校正结果正确 高倍镜校正结果正确 转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。每个校正结果不正确，扣2分 2 点酒精灯 5 取火柴等点燃酒精灯。灯帽倒扣在桌上。 灯帽乱扔扣2分，火柴棒乱丢扣2分 3 取载玻片 5 从广口瓶中取出载玻片，盖上瓶盖，烧去片上的酒精。 不盖瓶盖者扣2分， 在灯上长时间烧片扣2分 4 加菌悬液 5 操作正确 加量过多扣5分， 5 加盖玻片 5 取菌后，用镊子或手取一盖玻片，盖上盖玻片。 盖玻片下有气泡扣1分 6 镜检 30 用低倍镜或高倍镜观察。测量5个菌体 转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。 7 结果 10 正确者得全