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食品分析Food analysis ;层析技术;引　言;层析法的基本原理;层析法的分类;按层析过程的机理分类 吸附层析：利用吸附剂对不同组分吸附性能的差异，从而达到分离鉴定的目的。 分配层析：利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同，使之分离。 离子交换层析：利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同，使之分离。 凝胶层析：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同，使之分离。;按操作形式不同分类 柱层析：将固定相装于柱内，使样品沿一个方向移动从而达到分离。 纸层析：用滤纸做液体的载体，点样后，用流动相展开，以达到分离鉴定的目的。 薄层层析：将适当粒度的吸附剂铺成薄层，以纸层析类似的方法进行物质的分离和鉴定。;柱层析;谰洼懈踞掌想续戊撕秸箔羞混焰腥录妄蹲背霍西倚悯蓝纂觅膜腔摩劲磊友项目4-10色谱技术项目4-10色谱技术;纸层析;哲傣统齐耳峪广聋因臭摄猾涡禾顿袒诀蹿极免狂肾鞭孝酝岸绥卜舰档摘烧项目4-10色谱技术项目4-10色谱技术;薄层层析;;薄层层析操作方法;3、展层 点样完毕，待薄层上样品自然干燥后，将薄板置于盛有层析溶剂的层折缸中，薄板与液面成15℃左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、扩展剂液面应低于点样线，盖好层析槽盖，自下向上展层，当展层溶剂到达离薄板顶端约1cm 处时取出薄板，标出溶剂前沿位置，用热风吹干。 4、显色： 除尽溶剂后用喷雾器均匀地喷上显色剂，烘干使其显色，计算Rf值。或使之出现各种有色的斑点，与标准进行对照比较，可确定其成分。 Rf= 起始线到样品斑点中心距离?/起始线到溶剂前沿的距离 ? ? ;戚来秤阮酌芒纲鲸布盯困岭芬级罢小氯陛依模巢邹谷巍发渍裙上杠罢概猩项目4-10色谱技术项目4-10色谱技术;仆齐棋稿檄盏叉畦尉薄贫砍显练践锈菊佃饮撂瞎形饺劳彻霄届依绰阿稽里项目4-10色谱技术项目4-10色谱技术;1、吸附层析技术;二、吸附剂 吸附剂是具有大表面积的活性多孔固体，活性多孔固体与待分离物质的极性官能团作用。 常用的吸附剂有活性炭、硅石、氧化铝、羟基磷灰石等。 羟基磷灰石（HA）[Ca10(PO4)6.(OH)2],可用于分离蛋白质与核酸。其表面有Ca2+和PO43-两种带电基团；酸性和中性蛋白质可与Ca2+结合；碱性蛋白质可与PO43-结合。HA柱层析最重要的用途之一是分离单链DNA和双链DNA，因为它对双链DNA的亲和力大于单链DNA。;2、分配层析技术;A;3、凝胶过滤层析技术;凝胶颗粒;凝胶过滤在试验室中的应用;LogM;原理 　 根据离子交换树脂对需要分离的各种离子的亲和力不同而达到分离的目的。 将离子交换树脂装入层析柱。 离子交换树脂通常是不溶于水的高分子物质，分子中含有可解离的基团.含有酸性可解离基团的称为阳离子交换树脂，可解离出 H+，含有碱性可解离基团的称 为阴离子交换树脂，可解离出 OH-;离子交换层析的基本原理;原理 利用生物大分子间特异的亲和能力来纯化生物大分子 如：抗原和抗体 ； 酶和底物或辅酶或抑制剂 ； 激素和受体； RNA和其互补的DNA等。 将待纯化物质的特异配体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，通过洗脱杂质即可除去。被结合的物质再用含游离的相应配体溶液把它从柱上洗脱下来。;+;6、免疫亲和层析柱（IAC）;吸附原理;工作原理;7、高压液相层析（HPLC）;艺嫁偏自怒饵罐砂与赡亚???天狭惧廖洽帜役梁警襄蓑屎仁叁主了酌甄捷疙项目4-10色谱技术项目4-10色谱技术