萘乙酸对睾丸细胞增殖及凋亡的影响研究.pdfVIP

萘乙酸对皋丸细胞增殖与凋亡的影响研究 中文摘要 目的本研究采用体外细胞培养和喂饲小鼠染毒饲料的方法，观察了萘乙酸 (0【．naphthlcetic 胞增殖与凋亡的影响。 方法 l体外睾丸细胞增殖活性水平：取正常小鼠睾丸组织制成细胞悬液，分别加 umol／L、50umol／L、 入不同浓度的NAA与睾丸细胞共同培养，测定(1)25 100 Il la umol／L、200mol／L、400mol／LNAA对睾丸细胞增殖活性的影响；(2) 50 pmol／L umol／L和100 NAA在3、6、12、24、48h对睾丸细胞增殖活性的影 响。用MTT法测定睾丸细胞增殖活性水平。 2动物实验：将25只健康雄性昆明种小鼠随机分为5组，每组5只。正常对照 组和阳性对照组小鼠喂饲普通颗粒饲料，高、中、低剂量组分别将5000、1000、 200mg／kg的萘乙酸加入饲料中喂饲小鼠，阳性对照组于处死前3天每天腹腔注射 环磷酰胺20mg／kg体重。小鼠喂养4周。(1)增殖水平：用MTT法测定各组睾丸细 胞增殖活性水平，用免疫组织化学方法检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)表达(2) 脂质过氧化指标：摘眼球取血，分离血清，购买相应的测试盒测定血清中谷胱甘 肽过氧化物酶(GSH-Px)水平和丙二醛(MDA)含量。(4)体重：在饲养过程中， 每三天测定小鼠体重一次，并绘制生长曲线。(5)睾丸／体重指数：小鼠处死后 取下睾丸组织称其重量，并计算睾丸／体重指数。 结果 1、体外睾丸细胞增殖活性水平：细胞增殖活性测定结果显示，睾丸细胞体 外培养24h，50umol／L剂量组和正常对照组睾丸细胞增殖活性分别为0．761± IJ 剂量的增加，50、100、200、400mol／LNAA组的睾丸细胞增殖活性依次降低。 随着作用时间的延长50、100pmol／LNAA组的睾丸细胞增殖活性逐渐降低。结果 表明NAA对睾丸细胞的增殖活性有抑制作用。 2、动物实验： (1)增殖水平：MTT结果显示，高剂量组和正常对照组的睾丸细胞增殖活性 组PCNA阳性表达率为8．9％，正常对照组为34．9％，经检验，差异有显著性(PO．05)。 IIIII I I IIIIII lllIll Ul Y1 (2)凋亡水平：高、中剂量NAA组Bcl-2阳性表达率分别为li．4％和24．9％， 正常对照组为33．3％，经检验，差异均有显著性(P0．05)。高剂量组和正常对照 组Caspase-3阳性表达率分别为41．3％和9．1％，差别有统计学意义。 ±11．32 nmol／ml、8．41 (P0．05)。MDA含量高剂量组和正常对照组分别为10．41±0．12 ±O．12 nmol／ml，差异有统计学意义(P0．05)。 (4)体重：给予萘乙酸28天以后，各剂量组小鼠体重与对照组相比均有所 降低，高、中剂量组小鼠体重分别为14．96±0．83和31．48±1．19，与对照组相比 差异有显著性(P0．01)。 (5)睾丸／体重指数：高剂量组与正常对照组睾丸／体重指数分别为(1．383 正常对照组升高(P0．05)。 结论 I、NAA又#睾丸细胞的增殖活性有抑制作用，可降低睾丸细胞PCNA蛋白的 表达水平。 胞凋亡。 3、NAA可增加自由基对细胞的氧化损伤，增加了脂质过氧化水平。 4、NAA对d鼠的生长有抑制作用，造成睾丸／体重指数增加。 硕士研究生：孙巧平(卫生毒理学) 指导教师：钟迸义教授 关键词：小鼠；萘乙酸；睾丸细胞：增殖：凋亡 Effectof acid