藏红花素对急性白血病患儿骨髓间充质干细胞增殖和功能的影响.pdfVIP

摘要 目的 研究化疗及不同浓度藏红花素对急性白血病患儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)增 殖及功能的影响。 方法 收集正常儿童，新发急性白血病患儿，化疗6个月及化疗1年后的急性白血病患 儿骨髓各lO例，全骨髓法培养出BMSCs，分别设为正常对照组(A)，实验组分为新 鉴定。用含不同浓度藏红花素(0、0．3125mg／ml、0．625 mg／ml及 mg／ml、1．25 2．5mg／m1)的低糖DMEM(L—DMEM)培养液分别培养各组BMSCs48h、72h及96h。倒 置显微镜观察各组BMSCs形态及增殖情况；MTT法检测经不同浓度藏红花素、不同 时间作用后的各组BMSCs增殖率；ELISA法测定作用96小时后各组细胞上清液干细 胞因子(SCF)及肿瘤坏死因子一a(TNF_a)的水平。 结果 CD73，而表达CD34、CD45及HLA—DR的细胞均低于2％。 组BMSCs形态较规则，但增殖速度明显低于正常对照组；C及D组BMSCs形态不规则， 增殖速度明显低于A组。 值明显低于C组OD值，差异有统计学意义，(pO．05)；加入不同浓度藏红花素培养96h 1．25mg／ml时的增殖率最高，与其他各组比较均有显著性差异(仄0．05)，当藏红花 素浓度升高至2．5mg／ml时，各组细胞增殖率反而下降。 {一I删删坠 (F=5．58，6．12；pO．05)，亦以1．25mg／ml浓度组下降最明显。 结论 1．急性白血病忠儿治疗前BMSCs的形态及细胞表型与正常BMSCs无明显差异，但 其增殖活性明显降低，产生SCF及TNF-Q水平异常增高，提示急性白血病患儿骨髓发 生了造血微环境的紊乱。 2．化疗6月后急性白血病患)LBMSCs贴壁较前缓慢，形态不规则，增殖活性及产 生SCF及TNF-Q水平均明显降低，提示化疗可损伤BMSCs的形态、增殖活性及功能。 6月后明显减低，提示化疗强度越大，对BMSCs的损伤越明显。 4．治疗前急性白血病患)LBMSCs经藏红花素作用后，增殖活性无明显改变，但产 生SCF及TNF-Q水平较前明显降低，提示藏红花素可调节急性白血病患儿造血微环境 紊乱。 ．5．化疗6月后急性白血病患儿BMSCs经藏红花素作用后产生TNF—a的水平明显 降低，提示藏红花素可减轻造血抑制。 6．化疗6月及12月后急性白血病患)LBMSCs经藏红花素作用后其增殖活性及产生 SCF的水平明显升高，提示藏红花素可促进化疗后受损的BMSCs增殖活性及功能的恢 复。 硕士研究生李丹妮(儿科学) 指导教师 孙立荣教 授 关键词：骨髓间充质干细胞；藏红花素；增殖活性；干细胞因子；肿瘤 坏死因子 Abstract ective Obj The ofthe wastoassesstheeffectsofadjuvant objective presentstudy andcrocinonbonemarrow stem children chemotherapy mesenchymalcells(BMSCs)of 嘶thacuteleukemia m)． Methods： 硼1eBMSCs fromthebonemarrowsharvestedfrom30childrenwithAL separated four and10normalchildrenweredividedinto groups：Pre—chemotherapygroup(B)， 6-month 2一month theNo