萘乙酸对小鼠肝细胞增殖及凋亡的影响研究.pdfVIP

萘乙酸对小鼠肝细胞增殖与凋亡的 影响研究 中文摘要 目的：本实验采用体外细胞培养和动物实验的方法，观测萘乙酸对肝细胞增殖活性、 体重、肝脏体重比等指标，探讨萘乙酸对肝细胞增殖与凋亡作用和对小鼠抗氧化能 力的影响。 方法： 1体外实验：将正常小鼠肝脏匀浆后制成肝脏细胞悬液，分别加入浓度为 0Il u IJ p u Il mol／L、25mol／L、50mol／L、100mol／L、200mol／L、400mol／L的萘乙 酸培养24h，用MTT法测定肝细胞增殖活性；取肝细胞细胞悬液分为正常对照组、 50p mol／LNAA组和100u 胞增殖活性。 2．体内实验：体重18一--209健康昆明小鼠50只，雌雄各半，于本实验室适应 性喂养5天后，采用完全随机分组的方法，将实验动物分为正常对照组，高、中、 低剂量组和阳性对照组共5个组，每组10只，雌雄各半。高、中、低剂量组动物饲 阳性对照组喂饲普通饲料；阳性对照组于实验结束前3天，每天腹腔注射环磷酰胺 20mg／kg一次。各组动物均自由进食、饮水，实验周期为4个周，眼球取血处死小 鼠。用MTT法检测肝细胞增殖活性，用免疫组化的方法检测肝组织的PCNA、Bcl一2 和Caspase-3表达水平，分光光度法测定血清丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活 性，用天平称小鼠体重和肝脏重量等指标。 结果： Il l体外实验结果：肝细胞体外培养24h，100mol／Li}lj量组和正常对照组肝细胞 u 在同一作用时间点，随着NAM}U量的增加，50、100、200、400mol／LNAA组的肝细 胞增殖活性依次降低。随着作用时间的延长50、100pmol／LNAA组的肝细胞增殖活 性逐渐降低。结果表明NAA对肝细胞的增殖活性有抑制作用。 I[III I l Y1 (1)肝细胞增殖水平：高剂量组和正常对照组的肝细胞增殖活性分别为0．794 表达率为11．2％，正常对照组为33．1％，经检验，差异均有显著性(PO．05)。 和8．2％，正常对照组为6．3％，经检验，差异均有显著性(P0．05)。高剂量组和正 ±O．24 nmol／ml和9．17±O．17nmol／ml，谷胱甘肽过氧化物酶含量高剂量组和 正常对照组分别为798．95±10．61NU／ml和1190．20±14．78NU／ml，差异有 统计学意义(P0．05)。 (4)体重和肝脏体重比：实验28天后，各剂量组小鼠体重与对照组相比均有 对照组相比差异有显著性(PO．05)。高剂量组和正常对照组肝脏体重比分别为 117．73±5．36和48．18±5．39，差别有显著性意义(PO．05)。 结论： 1、萘乙酸对小鼠肝细胞增殖活性有抑制作用，可降低肝细胞PCNA表达水平。 细胞凋亡。 3、萘乙酸能够抑制肝细胞增殖并促进肝细胞凋亡，可能是由于萘乙酸能够诱导 机体自由基产生和脂质过氧化程度增强，从而导致肝脏的氧化损伤引起的。 4、萘乙酸能够使小鼠体重减轻，并提高肝脏体重比，进一步说明萘乙酸对机体 有一定的毒害作用，并能引起肝脏损伤。 硕士研究生：崔静(卫生毒理学) 指导教师：钟进义教授 关键词：萘乙酸；丙二醛；谷胱甘肽氧化物酶：细胞增殖；细胞凋亡 aceticacidon effectof proliferation onthe naphthalene Study