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传学实验
实验 细胞凝集反应(2学时 验证性实验)
1、观察血细胞的凝集现象;
2、掌握凝集素促使细胞凝集的原理。凝集素(1ectin)是一类含糖的(少数凝集素例外)并能与糖进行专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素促使细胞凝集主要是由于它能与细胞外被的糖分子相连接、在细胞间形成“桥”的结果,且加入与凝集素互补的糖分子可以抑制细胞间的凝集反应。2%的红细胞:以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),用生理盐水洗5次,每次2000 r/min,离心5 min,最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液
器材:显微镜、托盘天平、载玻片若干、滴管2支、离心管2支。?
PBS缓冲液:称取NaCl 7.2g、NazHP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸馏水,定容至l000 mL,调pH值到7.2。?
Alsever 溶液
葡萄糖 2.05g
柠檬酸钠(Na9C6H5O7.2H2O) 0.89g
柠檬酸(C6H 6O7.H2O) 0.05g
氯化钠 0.42g
蒸馏水 100ml
调PH 至7.2,过滤灭菌或高压灭菌10min,置4℃冰箱保存。
四、实验步骤
①称取土豆去皮块茎2g加10 mL PBS缓冲液,浸泡2h(浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素)载玻片上滴一滴土豆凝集素再滴一滴2%红细胞液充分混匀
静置20 min低倍显微镜下观察血球凝集现象以PBS液加2%血细胞悬液作为对照实验
1.绘制简图,表示血细胞的凝集过程;
2.图示血细胞凝集的原理。
实验 有丝分裂制片技术和显微观察(2学时 验证性实验)一、实验目的
通过对植物组织的取材、预处理、解离、染色、压片等制片步骤的学习,掌握植物制片技术,奠定细胞遗传学的研究技术;通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去,使子细胞和母细胞的遗传组成一样,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等,常进行着剧烈的细胞有丝分裂。在细胞分裂的适当(分裂旺盛期)时候取材,进行预处理,固定、解离、染色和涂抹压片等方法,使细胞、染色体分散,便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。
三、实验材料及用品材料:用具:显微镜、剪刀(或刀片)、镊子、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、玻璃皿质量分数为15%的盐酸体积分数为95%酒精染色液:甲液:3克碱性品红,溶于70%酒精100ml(可长期保存),
乙液:甲液10ml,加入5%苯酚(石炭酸)水溶液90ml(限2周内使用),
染色液母液:B液45ml,37%甲醛6ml,冰醋酸6ml。
改良卡宝品红染色液:染色液母液10ml,
45%醋酸90ml,
山梨醇1克
配制后立即使用着色能力差,两周后着色能力增强。、实验步骤
㈠材料准备:2~3天置于盛有清水的小烧杯上,待根长1~2cm时,可取生长健壮的根尖制片观察。
㈡解离根尖、茎尖等体细胞需经处理,除去细胞间的果胶层,并使细胞壁软化,才便于压片。这种处理过程称为解离,解离时间的长短依植物材料和解离液的不同而不同。时间短细胞不易压散,时间过长,细胞被压破,且影响染色效果。
方法剪取的根尖?2?mm~?3?mm,立即放入盛有的玻璃皿中,在室温下解离3?min~5?min后取出根尖。
漂洗待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10?min㈣染色:
把根尖放进盛有的玻璃皿中,染色3?min~5?min。㈤制片:
用镊子将这段根采取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并且用镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地压盖玻片,这样可以使细胞分散开来。㈥显微观察
制备好的细胞学片子,置于显微镜的载物台上,先用低倍镜(10×10)调焦观察,寻找具有分裂相的细胞后,再转换到高倍镜(10×40)下观察。
实验作业
1. 制作细胞有丝分裂各时期图象片子1张
2. 描绘所观察到的细胞有丝分裂过程中各时期的图象,并简要说明染色体的行为特征。
实验 X-染色质的观察(2学时 验证性实验)实验 果蝇的雌雄鉴定和突
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