漆酶／木聚糖酶体系直接降解木质素的研究.pdfVIP

第l6卷第2期 纤 维 素 科 学 与 技 术 、，o1．16 NO．2 2008年6月 Journal of Cellulose Science and Technology Jun．2008 文章编号：1004-8405(2008)02-0012-06 漆酶／木聚糖酶体系直接降解木质素的研究 尤纪雪 r， 陈星星 ， 李雨楠 ， 叶汉玲 ， (1．南京林业大学 化学工程学院，江苏 南京 210037； 2．南京林业大学 江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室，江苏 南京 210037) 摘 要：采用漆酶／木聚糖酶体系 (LXS)直接降解木质素，对 LXS体系处理条件 进行优选。结果表明：LXS体系处理马尾松浆料的最佳条件为pH值4．2，温度45 ℃，浆浓3％，时问3 h，酶用量10 IU／g；漆酶有明显的增强作用，LXS处理的浆 料与对照浆相比，耐破指数、裂断长和撕裂指数分别提高了 30．81％、26．18％和 21-34％；并对LXS体系与漆酶／介体体系 (LMS)降解木质素能力以及酶处理对浆 料物理性能的影响进行比较，证明两种漆酶体系降解木质素能力相当，漆酶／木聚糖 酶体系可以代替昂贵的漆酶／介体体系降解木质素。 关键词：漆酶／木聚糖酶体系；漆酶／介体体系；木质素；马尾松浆料 中图分类号：Q55；0636．2 文献标识码：A 木质素是一种在自然界中储量极丰富、结构极复杂的天然芳香族高聚物，是在数量上仅 次子纤维素的第二大天然高分子材料，每年都以600亿吨的速度再生，因而是极具潜力的可 再生资源。采用生物方法降解木质素可以克服化学方法带来的弊端。在自然界中能够降解木 质素并产生相应酶类的生物只占少数，主要有真菌、细菌。其中真菌中属于担子菌纲的白腐 菌是最典型的、最有效的木质素分解菌，已被证明能彻底分解木质素，且能把复杂的木质素 高分子降解成CO2和H20【l之J。白腐菌降解木质素是通过其分泌的木质素降解酶的作用而实 现的。在白腐菌木质素降解酶系中，漆酶具有更大的实际应用价值。大量的研究证明，漆酶 在降解木质素时需在介体和氧存在下进行生物催化作用【3 ，因此使其工业化应用受到一定 的限制。 本文提出由白腐菌通过培养条件的调控，合成能直接降解木质素的漆酶／木聚糖酶 (LXS)体系，以代替处理复杂、成本高的漆酶／介体 (LMS)体系。该体系不同于漆酶与 木聚糖酶的混合酶，因为采用此混合酶应用于木质素降解时，仍需添加ABTS等介体【51o此 外这两种酶产自于不同菌种 (木聚糖酶大多由霉菌合成)，它们有各自最佳的应用条件，混 合后使用不一定能得到最佳效果 J。因此本文的研究结果将为漆酶今后的产业化应用提供技 术支撑和科学理论依据。 收稿日期：2007．10．23 基金项目：国家自然科学基金资助项目研究课题之一。 作者简介：尤纪雪 (1943～)，女，教授，博士生导师；主要研究方向：制浆化学及生物技术。 第2期 尤纪雪等：漆酶／木聚糖酶体系直接降解木质素的研究 I3 1材料与方法 1．1 材料 1．1．1 马尾松浆 马尾松浆由福建青山纸业股份有限公司提供，原浆卡伯值为28．89，白度为25．86％SBD。 1．1．2 漆酶／介体体系(LMS) 本实验所用的LMS中的漆酶由诺维信生物公司提供，经测定不含半纤维素酶及纤维素 酶。稀释后酶活为150IU／mL；介体紫尿酸来自Sigma公司。 1．1-3 漆酶／木聚糖酶体系(LXS) 由白腐菌Lentinus Lepideus通过培养条件调控合成粗酶液。其中漆酶酶活160 IU／mL， 木聚糖酶酶活4．04 IU／mL，含很少量的纤维素酶。不含木素过氧化物酶和锰过氧化物酶，由 南京林业大学微生物教研室提供。 1．2 方法 1．2．1 马尾松木浆的酶处理 将马尾松浆料与酶液、缓冲液和水在聚乙烯塑料袋中充分混合后，置于恒温水浴中加热， 每10～15 min搓揉一次，使浆料与酶液充分混合，至规定时间后取出。分离出的处理液以 备分析用，将所