1.1基因工程与蛋白质工程(公开课).pptVIP

蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 推测 推测 目的基因 化学合成 （3）化学方法人工合成目的基因 DNA合成仪 横匙狈诺穿迁镐锨渴祟矗文深涵苫印锚酚驯彩由谗豫腔廊磨华扛藻斩着秋1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 利用化学方法人工合成 （一）目的基因的获取 三、基因工程的基本操作程序 缸乾鸥拼糠锗逐伦果偷勿膛贴痊诡挛讯汤绿委医失峰沪郝祝嗣陈哟雷墒种1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q 用一定的_________切割 质粒，使其出现一个切 口，露出____________。 用_____________ 切断目 的基因，使其产生_____ ____________。 将切下的目的基因片段插入质粒的切口处， 再加入适量___________，形成了一个重组 DNA分子（重组质粒） 限制酶 黏性末端 同一种限制酶 相同的黏性末端 DNA连接酶 （二）基因表达载体的构建（核心步骤） 三、基因工程的基本步骤 纤绣惮店缸舅奋更烧殷焉衔堵赂北那僵诲灾窄勾蝎佰斗笆炸签塘世情鼠停1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q重组载体组成： 三、基因工程的基本步骤 a.目的基因 b.启动子 c.终止子 d.标记基因 （二）基因表达载体的构建（核心步骤） 产椽酵波射受柔靡返关故蟹均持桩侣玛拨魔右抉硫俩望谣撬僧馅大颓佬惩1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q将目的基因导入受体细胞 将受体细胞进行扩增 （三）将目的基因导入受体细胞 三、基因工程的基本步骤 1.植物细胞： 2.动物细胞： 3.微生物细胞： （受精卵、卵细胞、体细胞） （受精卵或早期 胚胎干细胞） 农杆菌转化法、基因枪法、 花粉管通道法 显微注射法 感受态细胞法 航额缮爆戒概做虾斧贴脾汤兹折轿打吸犬挣缴疤傣云劝程讣席苑穷殉们橡1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q1.将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法 （双子叶植物和裸子植物） Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入 植物细胞 插入 植物细胞染色DNA 表达 新性状 转入 农杆菌 橇散竭浇霞元禹蕾验膨伙迟趁篇箔遮撕贾钨腥吊南轨借蓝惧吟畦氦拯撤罐1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q　 EcoR Ⅰ 黏性末端　　　　 黏性末端 限制性内切酶的作用过程 幕网目科簧甭唆社仅杀瘫虫挡埔泅恢闸么扛硒伶昔腑穿揽放闭抢贰峡悟吓1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun qSma Ⅰ 平末端　　　平末端 堤类咳京点妄来蘑程岛条排涟蹦率吨漳丸蜕听蜘箍汹拯瞄菇鸵矢闸旱傀摄1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q G 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A 瓢保妈晦委价蚀祈攻逾格讶涛雁肺躯掠芜砌腻米抛弗儒率卓带免价件兆煤1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q(1)来源： (2)特点： 一种限切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 并在特定位点准确切割DNA (3)作用部位 磷酸二酯键 主要来自原核生物 二、基因工程的基本工具 1.基因工程的 ——限制性内切酶 坡东刘估瓢杠脊皋营烘梅矣报晋茄霄春榜游荚份嚣舔咖擂达芥侠蜜猜苹亭1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 用同种限制酶切割来源不同的DNA获得的黏性末端是否相同？ 相同 思考 不同的限制酶呢？ 不同 窘扭沽纹镶硼流斜撕砒历敲冕竞历昨澡魄铰学鱼避辐幼絮驶雾扇桶耪滋纂1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……GAATTC…… ……CTTAAG…… EcoRⅠ ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……GAATTC…… ……CTTAAG…… 不同来源的DNA片段混合 将不同种来源的DNA片段连接起来 生物A基因片段 生物B基因片段 ……G　　AATTC…… ……CTTAA　　G…… ……G　　AATTC…… ……CTTAA　　G…… 酶切 誊蔗角芽撂扁赠吨详卵汇订疮吮泻称统哉壮蛊擦鸭矽年作纬疤掐埋瞥踢谋1.1基因工程与蛋白质工程(公开课)metroun q（1）作用: 催化磷酸二酯键形成，连