永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子、细胞周期蛋白b1和pten的 .pdfVIP

１５１２ 　　　　　　　　　　　　　　第三军医大学学报，２０１６，３８（１３）　　 　　　　　　ｈｔｔｐ：／／ａａｍｍｔ．ｔｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　 ＤＯＩ：１０．１６０１６／ｊ．１０００５４０４．２０１５１１０２２ 永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子、细胞周期蛋白Ｂ１和ＰＴＥＮ的表达 １ ２ ３ ４ １ 胡梦竹 ，王　娟 ，张　巧 ，高社干 ，张功员　　（４５０００１郑州，郑州大学公共卫生学院：流行病与卫生统计学教 １ ３ ２ 研室 ，卫生毒理学教研室 ；０５００００石家庄，河北省人民医院病案统计室 ；４７１０００河南 洛阳，河南科技大学第一附属 ４ 医院肿瘤内科 ） 　　［摘要］　目的　观察核干细胞因子（ｎｕｃｌｅｏｓｔｅｍｉｎ，ＮＳ）、细胞周期蛋白Ｂ１（ＣｙｃｌｉｎＢ１）及抑癌基因 ＰＴＥＮｍＲＮＡ和蛋白的表达情况。方法　正常食管上皮细胞（ｓｈａｎｔｏｕｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ，ＳＨＥＥ）和永生化食管上皮恶变细胞（ｓｈａｎｔｏｕｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ，ＳＨＥＥＣ）连续传代培养，取对数生长期ＳＨＥＥ和ＳＨＥＥＣ细胞，采用ＲＴＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测细胞中ＮＳ、ＣｙｃｌｉｎＢ１及ＰＴＥＮｍＲＮＡ和蛋白的表达并做相关性分析，ＭＴＴ法检测抑制ＮＳ 表达后的细胞增殖活性。结果　以ＳＨＥＥ细胞中ＮＳ、ＣｙｃｌｉｎＢ１和ＰＴＥＮｍＲＮＡ的表达量为１，ＳＨＥＥＣ 细胞中对应的相对表达量分别为（２．０４７±０．５０７）、（２．２１４±０．２１３）及（０．６６８±０．１８８），两组比较差异 均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＳＨＥＥ及ＳＨＥＥＣ细胞中ＮＳ、ＣｙｃｌｉｎＢ１及ＰＴＥＮ蛋白表达量分别为（１．１４２± ０．１１３），（３．１６１±０．１０８）、（１．５８５±００５６），（２．１７３±０．０５８）及（１．８９４±０．３４１），（１．１６２±０．５２４），两组 比较差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＮＳｍＲＮＡ和蛋白与ＣｙｃｌｉｎＢ１ｍＲＮＡ和蛋白的表达呈正相关（ｒ＝ ０．８３２，Ｐ＜０．０１；ｒ＝０．９９１，Ｐ＜０．０５），与ＰＴＥＮｍＲＮＡ和蛋白的表达呈负相关（ｒ＝－０．９２４，Ｐ＜０．０１； ｒ＝－０．７６９，Ｐ＜０．０５）；ＭＴＴ检测结果显示，ＮＳＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ，ＲＮＡｉ）组与空白对照组和 阴性对照组在干扰后１２ｈ细胞增殖能力差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），而在干扰后２４、３６、４８ｈ差异有 统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　ＳＨＥＥＣ细胞中ＮＳ、ＣｙｃｌｉｎＢ１ｍＲＮＡ和蛋白的表达量均高于ＳＨＥＥ，而 ＰＴＥＮ的表达量低于ＳＨＥＥ，ＮＳ可能对细胞恶变有影响。 　　［关键词］　 永生化食管上皮恶变细胞；核干细胞因子；细胞周期蛋白Ｂ１；ＰＴＥＮ 　　［中图法分类号］　Ｒ３２９．２８；Ｒ７３０．２３；Ｒ７３５．１ ［文献标志码］　Ａ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｕｃｌｅｏｓｔｅｍｉｎ，ＣｙｃｌｉｎＢ１ａｎｄＰＴＥＮ ｉｎｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍａｌｉｇｎａｎｔｃｅｌｌｓ １ ２ ３ ４ １ １ ＨｕＭｅｎｇｚｈｕ，ＷａｎｇＪｕａｎ，ＺｈａｎｇＱｉａｏ，ＧａｏＳｈｅｇａｎ，ＺｈａｎｇＧｏｎｇｙｕａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙａｎｄＨｅａｌｔｈ ３ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅａｌｔｈＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ，Ｈｅｎａｎ ２ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，４５０００１；ＭｅｄｉｃａｌＲｅｃｏｒｄａｎｄＳｔａｔｉｓｔｉｃｓＲｏｏｍ，ＨｅｂｅｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ，Ｈｅｂｅｉ ４ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，０５００００；ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅ