突变型p53的转录调控作用探究.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 !Q笪2 学号—堑1202141207 突变型p53的转录调控作用研究 onthe Study transcriptional regulatory ofmutant funl‘、p531-unction 1953 指导教师姓名、职称 周建盎耋咝 湖南师范大学学位评定委员会办公室 s-O一五年五月 万方数据 摘要 在50％以上的肿瘤组织中，TP53基因发生了突变。绝大多数的p53突变是 发生在DNA结合结构域上的错义突变。突变型p53不但失去了肿瘤抑制功能，而 且还获得了新的致癌功能，这种获得性功能在肿瘤发生发展的各个阶段发挥着重 要的促进作用。突变型p53可能与细胞内的其他蛋白相互作用调节新的靶基因， 但具体机制尚不清楚。本论文关于突变型p53转录调控分子网络的研究，可以深 化对肿瘤发生发展的理解，为癌症预防和治疗提供新思路和新策略。 由精氨酸突变为组氨酸，即p53R273H)为研究对象，采用染色质免疫共沉淀结 基序(binding 基因进行了基因组定位、基因注释、KEGG信号通路分析、相互作用网络构建等 生物信息学分析，发现除了Y和2l号染色体上的靶基因较少之外，p53R273H 的靶基因几乎在其它染色体上平均分布。p53R273H的靶基因主要是细胞周期以 MAPK等信号通路中的基因。 由于我们发现p53R273H的结合基序和Spl的结合基序重叠，因此，我们推 于是，我们用内源和外源的免疫共沉淀实验检测Spl和p53R273H的相互作用， 的表达质粒共转染，发现转染p53R273H后荧光值显著增加，并随着转染量的增 加而增加，且在有Spl存在的情况下荧光素酶活性比Spl不存在的情况下荧光值 高。而转染野生型p53后荧光值下降。这些结果说明野生型p53抑制转录因子Spl 的活性，而p53．R273H突变体显著增强转录因子Spl的活性。 万方数据 和MAPK等信号通路中的关键基因，促进癌症的发生发展。 关键词：突变型p53，Spl，转录调控，结合基序，染色质免疫共沉淀 II 万方数据 ABSTRACT vast Inmorethan50％ofthetunlor ismutated．The tissues，TP53 majority gene aremissense intheDNA domain．The of mutants binding p53 mutation，occurring thetumor also new mutantnot loses p53 only suppressorfunction，butgains function．Gain-of-functionofmu