荧光定量RTPCR检测埃博拉病毒方法的建立.pdfVIP

中文：摘要 II 中文摘要 埃博拉出血热(EHF)是由埃博拉病毒(Ebolavirus，EBOV)引起的一种急性 出血性传染病，人感染后致死率高达90％，是人类危害最严重的传染病之～，对公 共卫生安全和人类的健康有很大的威胁。到目前为止，EHF还没有有效治疗的药物 和疫苗，而且在我国尚无此病症出现。因此，建立一种快速、准确和敏感的检测 方法显得尤为重要。 中公布的EBOVNP基因序列，设计引物和MGB探针，通过优化反应条件，建立了 一种检测EBOV Green I荧光定量RT-PCR方法。以体外转录的EBOVRNA为模板，该方法检测的 灵敏度可以达到1．0×103个拷贝／Ul，检测范围达到8个数量级为103-10如。建立 E基因组RNA无非特异性扩增。本文将荧光定量RT-PCR技术用于埃博拉病毒的定 s／z和SYBRGreen 量检测中，并且建立了OnestepMGB荧光定量RT—PER检测EBOV I荧光定量RT-PCR检测EBOV的方法，具有一定的创新性。该方法的建立对加快 我国EBOV诊断技术的研究具有重要推动作用。 用建立好的两种方法对我国不同地区不同物种的易感动物进行检测，结果显 示我国暂时还未发现EBOV。 Green 关键词：埃博拉病毒；MGB探针：SYBRI；检测 一蹴敝 溯 KEY WORDS：ebola Green virus，MGB I，detection． probe，SYBR Ⅱ 目录 目 录 摘要…………………………………………………………………………………··I Abstract………………………………………………………………………·…-…II 目录…………………………………………………………………………………··Ⅲ 第1章绪论………………………………………………………………………··1 1．1 EBOV的病原学特性………………………………………………………一1 1．1．1EBOV粒子的形态和结构……………………………………………一1 1，1。2EBov的分子生物学特性……………………………………………一2 1．2 EHF流行病学研究情况概述………………………………………………·3 1．2．1EBOV的自然宿主……………………………………………………一3 1．2．2EBOV的传播途径……………………………………………………”4 1．2．3EHF流行情况概述……………………………………………………。5 1．2．4EBOV的流行特征分析………………………………………………-．6 1．3 EHF的临床症状及病理变化………………………………………………·7 1．3．1EHF的临床症状………………………………………………………-7 1．3．2EHF的病理变化………………………………………………………’7 1．4 EBOV的实验室检验方法…………………………………………………一7 1．4．1病毒分离法……………………………………………………………8 1．4．2电镜检查………………………………………………………………8 1．4．3血清学检测……………………………………………………………8 1．4．4PCR检测………………………………………………………………·8 1．5 EHF的治疗及疫苗的相关研究……………………………………………·9 1．5．1EHF的治疗…………