用反向遗传操作技术产生致弱的H5亚型重组流感病毒.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 1’ ) # 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 用反向遗传操作技术产生致弱的 亚型重组流感病毒 ! 卢建红 龙进学 邵卫星 韦栋平 刘秀梵 （扬州大学 农业部畜禽传染病学重点开放实验室 扬州 $$%%: ） 摘 要：选择一株鹅源 亚型禽流感病毒（ ），缺失其 基因裂解序列的 个碱性氨基酸、使 裂解模式 H1# MN HM ! HM 由高致病性的 突变为低致病性的 ，将修饰的 基因克隆入转录 表达载体 OPQ3QQQRRQ $ST OPQ3KQ $ST HM I 、构建质粒 ，将该毒株和 亚型毒株的 全基因分别克隆入 ，构建质粒 UHJ$%%% UHJ$!8HM H:1$ 1M UHJ$%%% UHJ%48 1M 和 。将 与 或 组合、均用 （ ）提供 个内部基因， UHJ$%481M UHJ$!8HM UHJ%481M UHJ$%481M MIJK1I66 H#1# 4 两个组合的5 个质粒分别共转染VWK8# 细胞，产生了H1# 和H1$ 两个亚型的基因重排病毒。通过在鸡胚中的连 续传代和适应，个重组病毒血凝价上升到 : 、表面基因稳定、对 周龄 鸡不表现致病性， 重组病毒对 $ #X$ 4 KO* H1$ 鸡胚的毒力低于H1# 病毒。这种尝试证明反向遗传操作技术是研究MN 致病性和构建疫苗候选株的有用工具。 关键词：禽流感病毒， 亚型，反向遗传操作技术，基因重排，致弱 H 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） K5 L6 M %%%#84$%: $%% %#8%%68% $%%! 年初，在东南亚一些国家发生了由H1# H’/CC 等报道了完全以质粒为基础的反向遗传操 ［，］ 亚型禽流感病毒（ ， ）引起的 5 : MY=/C NC(.+C@/ =-.G MN 作系统 ， 等建立的 质粒拯救系统其载 H’/CC 5 高致病性禽流感疫情，这也严重地影响到我国的养 体的启动子和终止序列为U’( 8U’( 系统，以数量