质粒DNA.pptVIP

Ch2. Genomic DNA, Genes 基因gene——具有遗传功能的DNA片段1969分离到。 基因组genome——细胞内所携带的全部遗传信息DNA的总和；对多倍体生物指单倍体DNA的总和。 编码蛋白的结构基因 基因组DNA 复制转录的调控序列 功能尚不清楚的区域 病毒基因组 核基因组 原核生物基因组 真核生物基因组 线粒体DNA 核外遗传物质 叶粒体DNA 质粒DNA 非独立的基因组： 转位因子—能在基因组DNA中移动的DNA序列，不能独立存在，需插入核或核外DNA中。 1.基因组小，只有一个拷贝；大小差异大； 化学组成多样； 2.非编码序列较少； 3. 基因重叠现象 4.多顺反子结构； 核基因组之二 原核生物基因组 1.基本是单拷贝的； 2. 拟核（类核）结构； 3. 存在多顺反子结构； 4. 非编码序列相对较少； 5. 存在不同的功能识别区 复制起始区、复制终止区等 核基因组之三 真核生物核基因组 1.一般为双倍体, 基因组较大， 2.真核生物核DNA与蛋白质结合，形成核小体，再缠绕成染色质（染色体）； 3. 基因为单顺反子。 4. 基因组中非编码序列多； 5. 存在大量重复序列，重复次数可高达百万倍； 6. 大部分基因有内含子，因此基因不连续； 7. 具有多个复制起点，每个复制子的长度较小。 基因组结构与进化的关系： 1.基因组的物质组成从多样 → 单一； DNA、RNA分工明确 单链、双链，线状、环状→ 双链线状 2. 基因组由小→ 大； 3. DNA的利用率越来越低；（多拷贝、非编码 区、基因不连续） 4. 调控序列增多，调控方式更复杂。 DNA detective 探针 1.RFLP 附件 2.SSR/STR 3.SNP 应用：正常样本的差异鉴定 病理样本的变化 核外遗传物质的结构及功能 质粒DNA Plasmid 质粒的结构与功能 1. 存在于原核生物、真菌和少数植物细胞中，是一种核外遗传物质，但不是细胞生存所必需的； 2. 有自己的复制起始序列，独立于核DNA进行复制；（有独立的复制系统） 3. 质粒DNA含有少量编码蛋白的基因，这些基因对宿主细胞的生存影响不大，但能改变细胞的某些性状，如抗性、降解有机物的酶等； 4. 质粒是分子生物学中最常见的克隆载体。 质粒DNA的一般特性： 1.多数质粒是双链超螺旋结构 闭合环状 （covalently closed and circular DNA）， 简称cccDNA，少数线状； 2. 质粒具有可转移性，如F质粒； 3. 可整合性；（整合、重组 DNA的交换） 4. 拷贝数； 严紧型（一个或几个） 据细胞中质粒的多少 松弛型（十~几十） 5. 质粒DNA的不相容性 incompatibility 在同一个宿主细胞中，不能同时存在两种同一 不相容群的质粒（同一类型、同一复制系统的不同质粒不能同时存在于同一细胞中，但两种不同类型的质粒可存在于同一细胞中。） 几种常见的质粒 1. 细菌质粒 F—质粒 （又称F-因子或性质粒sex plasmid） 高频重组质粒，具可转移性和整合性， 拷贝数低； R—质粒 抗性质粒，含抗药、分解有毒物质 等的基因； Col质粒（大肠杆菌素因子） 含有编码控制大肠杆菌素合成的基因， （一种可以使不带Col质粒的细菌菌株致死的蛋白） Ti质粒——一种常用的基因工程载体 土壤中有一种叫根癌农杆菌(Agrobacterium tumerfaciens)的一种土壤微生物，它能感染90个科的双子叶植物的受伤组织。当这种土壤杆菌侵入受伤组织后，受伤组织便不断增生成为冠瘿瘤(craw gall tumor)。这种瘤的产生是由于根癌农杆菌细胞中存在