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三、防腐剂和灭活剂含量测定 生物制品在生产中为了脱毒、灭火和防止活菌污染，常加入适量本分、甲醛、氯仿和汞制剂等作为防腐剂和灭活剂。 对这些非有效成分，ChP2015中规定其含量应控制在一定限度内。 四、纯度检查 生物制品在经过精制后，要检查纯度是否达到规定要求，常用电泳法和高效液相色谱法。 ChP重组人促红素注射液（CHO细胞）纯度测定 1）亲水硅胶体积排阻色谱柱：排阻极限300kD，孔径24nm，粒度10μm，直径7.5mm,长30cm； 2）流动相：3.2mmol/L磷酸氢二钠-1.5mmol/L磷酸二氢钾-400.4mmol/L氯化钠，pH7.3； 3）上样量：20-100μg； 4）在波长280nm处检测，以人促红素色谱峰计算旳理论板数不低于1500。按面积归一化法计算人促红素纯度，不低于98.0%。 五、相对分子质量或分子大小测定 对提纯的蛋白质制品如白蛋白、丙种球蛋白或抗毒素，在必要时需测定其单体、聚合体或裂解片段的相对分子质量及分子大小； 提纯的多糖疫苗需测定多糖的分子大小及其相对含量。 常用方法：凝胶层析法 SDS法 超速离心分析法 六、其他 水分含量测定、酸碱度和氯化钠测定等 七、安全检查 1.安全检查的对象 菌毒种和主要原材料：1）用于生产的菌、病毒种，投产前必须按药典或有关规定要求，进行毒力、特异性和培养特异性等试验，检查其生物学特性是否存在异常。2）用于生产血液制品的血液，采血前必须对献血者进行严格的体检和血样化验，采集血后还应进行必要的复查。 半成品（包括原液）：在生产过程中，主要检查对活菌、活毒或毒素的处理是否完善，半成品是否有杂菌或有害物质的污染，所加灭活剂、防腐剂是否过量等。 成品：成品在分装或冻干后，必须进行出厂前的安全检查。逐批按药典三部或有关规定要求，进行无菌试验、纯菌试验、毒性试验、热原试验和安全试验等检查，以确保制品的安全性。 2.安全检查的内容 （1）过敏性物质的检查 1）过敏性试验 采用异体蛋白为原料制成的治疗制剂，需检查其中过敏源的去除是否达到允许限度。 豚鼠试验 2）牛血清含量的测定 主要用于检查组织培养疫苗，要求其含量不超过50ng/剂。 3）血型物质的检测 用人胎盘血或静脉血准备的白蛋白和丙种球蛋白，常有少量A或B型物质，O型血孕妇使用后，可能引起新生儿溶血症。 （2）杀菌、灭活和脱毒检查 一些死菌苗、灭活疫苗以及类毒素等制品的毒种多为致病性强的微生物，若为被杀死或解毒不完全，就会在使用时发生严重感染，故应做无菌试验、活毒检查和解毒试验。 （3）残余毒力和毒性物质的检查 1）残余毒力检查 2）残余毒力检查 3）毒性检查 4）防腐剂检查 （4）外源性污染的检查 1）野毒检查 2）热原试验 3）乙型肝炎表面抗原(HbsAg) 1.免疫力试验 1）定量免疫定量攻击法 2）变量免疫定量攻击法（50%有效免疫剂量测定法） 3）定量免疫变量攻击法（免疫指数测定法） 4）被动保护力测定 2.活菌数和或病毒滴度测定 1）活菌数（率）测定 2）病毒滴度测定 3.血清学试验 测定抗体水平或抗原活性 八、生物制品的效力测定 1.宿主细胞（菌）蛋白残留量的检查 ChP2015中均采用酶联免疫法 2.外源DNA残留量的检查 第一法 DNA探针杂交法 第二法 荧光染色法 3.残余抗生素的检查 4.产品相关杂质的检查 九、杂质与检查 * 破伤风杆菌 * 脊髓灰质炎病毒 * 脊髓灰质炎病毒 * 脊髓灰质炎病毒 * * * 抗核抗体Hep-2细胞 * 抗核抗体Hep-2细胞 * 抗核抗体Hep-2细胞 * 抗核抗体Hep-2细胞 * 抗核抗体Hep-2细胞 生物制品分析概论 生物制品: 以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成。 一、疫苗类药物 用病毒或立克次体接种于动物、鸡胚，或经组织培养后加以处理制造而成。 第一节 生物制品的分类 1、细菌类疫苗 由有关细菌、螺旋体或其衍生物制成的减毒活疫苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗。 皮内注射用卡介苗、伤寒Vi多糖疫苗、吸附破伤风疫苗、乙型脑炎灭活疫苗、乙型脑炎减毒活疫苗、人用狂犬疫苗等。 2、病毒类疫苗 由病毒、衣原体、立克次体或其衍生物制成的减毒活疫苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗。 口服脊髓灰质炎减毒活疫苗、麻疹减毒活疫苗、风疹减毒活疫苗、腮腺炎减毒活疫苗等。 3、联合疫苗 两种或两种以上疫苗原液按特定比例配制成的具有多种免疫原性的灭活疫苗或活疫苗。 伤寒