热化疗联合对人肺腺癌耐药细胞株A549-DDP作用及其.docVIP

　　热化疗联合对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP作用及其 毕业 ：陈雪琴 马胜林 牟翰舟 苏丹 冯建国 【摘要】 目的 观察热化疗联合对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP的影响及其机制，为临床上应用热化疗联合治疗非小细胞肺癌提供理论依据。 方法 CCK-8法检测A549、不同温度下A549 /DDP细胞对顺铂的敏感性；流式细胞仪分析热疗对A549/DDP细胞周期分布的影响；RT-PCR检测热疗对A549/DDP细胞ERCC1表达的影响。 结果 亲代人肺腺癌细胞株A549对顺铂的敏感性明显高于耐药细胞株A549/DDP，不同温度加热后A549/DDP细胞对顺铂的敏感性均有提高；热疗尤其是热化疗后G2/M期细胞明显增多，G0/G1期细胞明显减少（Plt;0.01）；热疗后A549/DDP细胞ERCC1mRNA表达未见明显改变。 结论 热疗能提高人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂的敏感性，热化疗具有协同作用。热化疗协同作用机制可能主要是诱导细胞周期阻滞，抑制细胞增殖，和DNA修复基因ERCC无直接相关性。 【关键词】 高温 化学疗法 肺肿瘤 抗药性 　　【Abjuctive】 Objective To observe the effects and mechanisms of hyperthermia therapy bined otherapy on multidrug-resistant human lung adenocarcinoma cell line A549/DDP, it ochemotherapy for clinic. Methods A549 or A549/DDP treated perature ia, A549/DDP cell cycle etry and ERCC1mRNA expression an lung adenocarcinoma cell A549 ore sensitive to cisplatin than drug-resistant cell line A549/DDP. Treated perature, drug sensitivity of A549/DDP to cisplatin all increased. Hyperthermia had significant effect on cell cycle ochemotherapy ore notable（Plt;0.01）. After hyperthermia, the expression of ERCC1 mRNA did not change. Conclusion Hyperthermia can significantly enhance the sensitivity to cisplatin in human multidrug-resistant lung cancer cell line A549/DDP. Thermochemotherapy has synergistic effects of inhibiting cell proliferation. The major synergistic mechanisms of thermochemotherapy are that they can induce cell cycle arrest、inhibit cell proliferation ,but have no correlation ia Chemotherapy Lung cancer Drug resistance 　　肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之1，即使最佳的联合治疗，非小细胞肺癌（nonsmall-cell lung cancer, NSCLC）5年生存率只有15％左右，75％晚期NSCLC患者的中位生存期只有10个月。近年来热疗因其安全有效而逐渐成为继以手术、放疗、化疗、生物治疗后的又1种抗肿瘤手段，而且与其他治疗方法有协同作用，故现正逐渐应用于肿瘤的综合治疗中。但热疗与化疗的协同作用机制错综复杂，目前尚未完全明了，故以人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP［１］为对象，观察热疗联合化疗协同抑制该耐药细胞株增殖及其机制，为临床综合治疗提供有力的依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP，重庆第3军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所建立；人肺腺癌亲代细胞株A549，浙江省肿瘤医院肿瘤研究所保存。顺铂（cisplatin, DDP）为云南××制药有限公司产品（批号：050101），CCK-8（cell count kit）试剂盒为日本同仁化研究所产品，P－糖蛋白抗体为法国BC公司产品，PI染色ABC试剂盒为美国BD公司产品，