浓度和纯度检测.pptVIP

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浓度和纯度检测

DNA浓度、纯度的测定 --分光光度法; 在分子生物学实验中,提取DNA后,往往需要测定其纯度和浓度,在纯度达到标准,浓度调整到所需浓度后,才能进行下一步实验。 ;实验目的 ;DNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。;当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时,会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230,计算其比值来衡量样品的纯度。;材料、试剂及器具 1、?? 材料 上次实验提取的植物基因组DNA样品 2、?? 试剂 TE缓冲液,灭菌重蒸水 3、?? 器皿 核酸测定仪;塑料比色皿;移液枪;Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪 ;操作步骤; 根据其在260、280、310nm下紫外吸收值A260、A280、A310,可确定其纯度和浓度。 ;RNA

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