轮藻培养条件的优化.docVIP

轮藻培养条件的优化 届 别 2008届 系 别 生物系 专 业 生物科学 姓 名 指导教师 二○一二 年 五 月 轮藻培养条件的优化 学生 指导教师 张猛 摘 要 轮藻是一种广泛分布并具有一定经济价值的水生植物，但其人工培养鲜见报道。本实验在M-11培养基的基础上，调整N/P为16:1、40:1和80:1Fe2+离子浓度为0.3mol/L、0.6mol/L和0.8mol/L等不同梯度来培养轮藻，通过称重法来研究适合轮藻人工培养的培养条件。结果显示：轮藻培养的最适N/P为40:1，最适Fe2+离子浓度为0.3mol/L。进而得出一种轮藻培养的适宜的培养基配方为NaNO3 250mg/LKH2PO4 10mg/L，MgCl2·7H2O 29mg/L，CaCl2·5H2O 40mg/L，Na2CO3 20mg/L，EDTA-NaFe 2.25mg/L，Na2EDTA·2H2O 1mg/L。 Fe2+浓度； 培养 前言 轮藻，别名水茴香，是一种大型沉水藻类植物[1]。轮藻门仅一纲一目，轮藻纲（Charophyceae），轮藻目（Charales）。常见者为轮藻属和丽藻属。植物体具有类似根、茎、叶的分化。茎有节和节间之分，在节上轮生有相当于叶的小枝，有些种类体外被有钙质或胶质。细胞内具有小形盘状或椭圆形色素体；光合色素为叶绿素a和b，以及β胡萝卜素、叶黄素和其他类胡萝卜素；无蛋白核；同化产物为淀粉，单核。在成熟的细胞中具有大的中央空泡。 轮藻广泛分布于世界各地，但主要产于北温带，共约180种。中国已知有27种，其中9种为特有种。多生于钙质丰富、有机质较少、呈微碱性的淡水或半咸水中，特别是在透明度大，少浮叶植物生长的浅水湖、池塘、沼泽中，常大量生长。 国外关于轮藻的研究，过去多集中在其形态、生理、细胞学以及多样性等方面，而对轮藻应用方面的研究很少，仅Zeneveld，Groves和Pal等人在他们的论著中提到过[2～4]，而近几年来的研究还涉及到了环保、农业、医药业等方面的应用。 Caballero于1919年首次报道了在有轮藻生长的水域中没有蚊幼出现的现象[2]，而且这一现象也得到了大部分藻类学者的认同。同时，Russell和Balsas的研究显示蚊幼的生境与轮藻的生境几乎是惊人的相似。这就意味着轮藻对蚊幼可能存在驱避和杀灭作用。而Cabllero、Stroede和Buhot等认为轮藻可以产生某种对蚊幼有毒的物质，这种物质可以被轮藻释放到其生活的水域中，从而使其生活的水域中没有蚊幼的存在[2]。但Blow和Pal等却认为轮藻并不会产生有毒物质，之所以其生活的水域中没有蚊幼是由于一些其它的因素，Pal更给出了明确的原因，他认为是轮藻周围生活着一种以蚊幼为食的龙蝇的幼虫，出于对这种掠食者的驱避，所以雌蚊不在有轮藻生活的水域产卵[ 4 ] 。然而根据Gonzalves和Vaidya在1963年的实验显示，和轮藻共同培养的蚊幼会死亡，但死亡的蚊幼尸体完整，并非被其它掠食动物所杀死[5]。表明轮藻中含有可对蚊幼产生较强的致死作用的物质。 Thienemann记述了在巴厘岛Kedisan的Batoer湖边，周围的居民将湖中大量的轮藻堆积在岸边，待其腐烂后便作为肥料施到地里。在欧洲很多地方也将轮藻作为肥料，Prosper和Wasmund对此都进行过报道。此外，Prosper还提到轮藻的特殊气味可以驱散一些根际害虫和啮齿动物，防治其对作物根际的破坏[3]。也就是说轮藻不仅可以作为肥料而且还有一定的农药功效，非常符合现今绿色农业发展的要求。 根据Prosper的记载，西班牙的穷人用在河岸边堆积的“硝石”进行泥浴来祛除疾病，而这些所谓的“硝石”就是从周围池塘中捞起晒干后呈白色的轮藻。无独有偶，Wasmund也记载了在德国的药店中出售轮藻，人们买来用于预防一些疾病。 中国也是轮藻的主要产地之一，但我国的相关研究起步晚, 虽在20世纪的80年代一些单位在轮藻生理、细胞学、多样性以及现生与化石轮藻研究的相关性等方面进行了较为全面的调查研究，如四川大学的兰利琼等人研究了轮藻科(Characeae)三个属的无丝分裂，她们选取了轮藻科3个属的轮藻植物：丽藻属的乳突丽藻(Nitella papillata)、拟丽藻属的钝节拟丽藻(Nitellopsis obtusa)和轮藻属的弧枝轮藻 (Chara connivens)进行细胞核无丝分裂的观察。实验结果显示，三种藻不同生长时期、不同生长部位的藻体细胞其分裂方式均为无丝分裂，未发现有丝分裂。在细胞核无丝分裂过程中，染色质不发生浓缩，核膜不解体，核的分裂部位不固定，产生的子核大小不等，形态多样。同种藻