2014年大三上微生物复习提纲.docVIP

微生物复习题 4染色:将载玻片平放于载玻片支架上滴加染液覆盖涂菌部位即可吕氏碱性美蓝1.5min草酸铵结晶紫染液或齐氏石炭酸复红染液1min. 5．水洗?倾去染色液，斜置载片，细水流由载片上端流下，不得直接冲在涂菌处，直洗至水无色为止。 6．干燥?自然晾干或用吸水纸轻轻地吸干，注意不要擦掉菌体。 7．镜检?待标本完全干燥后，先用低倍镜和高倍镜观察，将典型部位移至视野中央，再用油镜观察。 油镜镜检：在高倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心，将高倍镜转离工作位置，再待观察的样品区域滴上一滴香柏油，将油镜转到工作位置，油镜镜头此时应正好浸泡在镜油中。将聚光器升至最高位置并开足光圈，若所用聚光器的数值孔径值超过1.0，还应在聚光镜与载破片之间也加滴香柏油，保证其达到最大的效能。调节照明使视野的亮度合适，微调细调节器使物像清晰，利用推进器移动标本仔细观察并记录所观察到的结果。 另一种常用的油镜观察方法是在低倍镜下找到观察的样品区，用粗调节器将镜筒升高，将油镜转到工作位置，然后在待观察的样品区域滴加香柏油。从侧面注视，用粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在镜油中并几乎与标本相接，调节聚光器的数值孔径及视野的照明强度后，用粗调节器将镜筒徐徐上升，直至视野中出现物像并用细调节器使其清晰准焦为止。 培养基设计的原则（96） 1. 目的明确 2.营养协调 3.理化适宜：（1）ph 细菌为6.5~7.5 放线菌为7.5~8.5 酵母菌为3.8~6.0 霉菌为4.0~5.8 藻类为6.0~7.0 原生动物为6.0~8.0 （2）渗透压与水活度 革兰氏阴性细菌的渗透压可达20个大气压，革兰氏阳性细菌则可达5~10个大气压；各微生物的生长繁殖水活度值在0.998~0.60之间 （3）氧化还原电势 一般好氧菌生长氧化还原电势在+0.3~0.4v，兼性厌氧菌在+0.1v 以上时进行好氧呼吸产能，在+0.1v以下时进行发酵产能；厌氧菌只能在生长+0.1v以下的环境中 4.经济节约：（1）以粗代精（2）以“野”代“家”（3）以废代好（4）以简代繁（5）以氮代朊 （6）以纤代糖（7）以烃代粮（8）以“国”代“进” 双功能营养物与三功能营养物（90） 对于某一营养物质，如果既能作为碳源和能源或者是氮源和能源，我们就把这样的营养物质叫做双功能营养物；如果是既能作为碳源又能作为氮源和能源，我们就把这种营养物质叫做三功能营养物。 选择性培养基（102） 一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某一化学、物理因素抗性的原理而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。具体分为两大类： 加富性选择培养基;利用该分离对象对某种营养物有一种特殊“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物，就可使原先极少量的筛选对象很快在数量上接近或超过原试样中其他占优势的微生物，因而达到富集或增殖的目的 抑制性选择培养基：利用该分离对象对某种制菌物质所特有的抗性，在筛选的培养基中加入这种制菌物质，经培养后，使原有试样中对此抑制剂表现敏感的优势菌的生长大受抑制，而原先处于劣势的分离对象趁机大量繁殖，最终在数量上取胜 肽聚糖的合成 见书上142 肽聚糖的生物合成过程复杂，步骤多，而且合成部位几经转移。为此把肽聚糖的生物合成分为细胞质中、细胞膜上以及细胞膜外合成3个阶段。正因为肽聚糖合成不是在一个地方完成的，所以合成过程中必须要有能够转运与控制肽聚糖结构元件的载体参与。已知有两种载体：一种是尿苷二磷酸（UDP），另一种是细菌萜醇。以了解得较清楚的金黄色葡萄球菌的肽聚糖合成为例。第一阶段：在细胞质中合成胞壁酸五肽。这一阶段起始于N-乙酰葡糖胺-1-磷酸，它是由葡萄糖经过下列反应步骤生成的： 自N-乙酰葡糖胺-1-磷酸开始，以后的N-乙酰葡糖胺、N-乙酰胞壁酸以及胞壁酸五肽都是与糖载体UDP相结合。第二阶段：在细胞膜上由N-乙酰胞壁酸五肽与N-乙酰葡糖胺合成肽聚糖单体——双糖肽亚单位。这一阶段中有一种称为细菌萜醇（Bcp）的脂质载体参与，这是一种由11个类异戊二烯单位组成的C55类异戊二烯醇，它通过两个磷酸基与N-乙酰胞壁酸相连，载着在细胞质中形成的UDP-N-乙酰胞壁酸五肽转到细胞膜上，在那里与N-乙酰葡糖胺结合，并在L-Lys上接上五肽(Gly)5，形成双糖肽亚单位。第三阶段：已合成的双糖肽插在细胞膜外的细胞壁生长点中并交联形成肽聚糖。这一阶段的第一步是多糖链的伸长。双糖肽先是插入细胞壁生长点上作为引物的肽聚糖骨架(至少含6～8个肽聚糖单体的分子)中，通过转糖基作用使多糖链延伸一个