玄赤归镇痛胶囊质量标准研究.docVIP

　　玄赤归镇痛胶囊质量标准研究 申祥国 湖南省邵阳市中西医结合医院药剂科，湖南邵阳 422000 [摘要] 目的 建立玄赤归镇痛胶囊的质量标准。方法 实验中主要利用TLC检测方法对相关中药，如：当归、川芎、延胡索、三七等进行定性检测；使用HPLC法测定三七中三七苷R1的含量。结果 薄层色谱图斑点清晰，阴性对照无干扰；三七皂苷R1在71.5～1023μg/mL范围内线性关系良好，平均回收率 91.7%，RSD为1.4%（n=5）。结论 该方法专属性强，灵敏度高，重现性好，可用于玄赤归镇痛胶囊的质量控制。 [ .jyqkL，超声处理5分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。取玄赤归镇痛胶囊去川芎、当归的阴性样品，同法制成去川芎、当归的阴性样品溶液。另取当归对照药材和川芎对照药材各2 g，分别加乙醚20 mL，在超声环境下进行15 min 的处理，滤过，滤液挥干，残渣分别加乙酸乙脂1 mL使溶解，作为对照药材溶液。采用照薄层色谱法对上述三种溶液进行实验，实验中分别将其放在硅胶G薄层板上，使用以环己烷－乙酸乙酯作为其展开剂，并进行相关其他步骤，如：展开，取出，晾干等，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。缺川芎、当归的阴性样品无干扰。结果见图1。 实验中，选择10粒本品内容物向其中加入50 mL甲醇，在超声下进行30 min的处理，并除去废液，向残渣内加入100 mL水，并将其PH控制为碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10 mL，合并乙醚液，并将其烘干，然后向残渣中放入1 mL甲醇进行溶解等。实验中选取玄赤归镇痛胶囊去延胡索的阴性样品，采用相同的方法进行阴性溶液制备。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于以含1%氢氧化钠的羧甲基纤维素溶液为粘合剂制备的硅胶G板上，以甲苯－丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中约3 min后取出，挥尽吸附的碘后, 置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，缺延胡索的阴性样品无干扰。结果见图2。 续断取本品10粒内容物，加浓氨试液10 mL，混匀，放置1小时，加二氯甲烷30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液置分液漏斗中，用盐酸溶液(4→100)30 mL分次振摇提取，提取液用浓氨试液调节pH值至10，再用二氯甲烷20 mL分次振摇提取，合并二氯甲烷液，浓缩至0.5 mL，作为供试品溶液。取玄赤归镇痛胶囊去续断的阴性样品，同法制成去续断的阴性样品溶液。另取续断对照药材3 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚－丙酮(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺续断的阴性样品无干扰。具体见图3。 三七取本品20粒内容物，加水25 mL，振摇10 min，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15 mL，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10 mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取玄赤归镇痛胶囊去三七的阴性样品，同法制成去三七的阴性样品溶液。另取人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rg1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇分别制成每1 mL各含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述五种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－乙酸乙酯－水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂，展开，取出, 晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图4左；置紫外光灯(365 nm)下检视，显相同的荧光斑点，缺三七的阴性样品无干扰。见图4右。 3 三七皂苷含量测定 3.1 色谱条件色谱条件色谱柱 Agilent Hypersil(250 mm×4.0 mm,5 μm)C18柱；流动相：乙腈水(15∶85 12 min；30∶70 45 min；15∶85 v/v)；流速：1 .0mL/min；柱温35℃；检测波长203 nm；进样量10 μL，按上述色谱条件试验，三七皂苷R1 可达基线分离，且分离效果良好，R≥1.5；按三七皂苷R1 峰计算。 3.2 对照品溶液的制备 精密称取三七皂苷R1 对照品35 mg，置于5 mL容量瓶中，并使用甲醇进行溶解和稀释，将其作为对照品溶液。 3.3 供试品溶液的制备 实验中选择10粒药物制备溶液，精密称定，研细，混匀，取约1.0 g，精密称定，加入7