Dna分子标记的原理与技术.pptVIP

（Techniques of Molecular Markers） ;分子标记技术可用于：; 鱼类作为实验动物，比哺乳动物等具有更多的优点： 1、产卵量大 2、体外受精 3、体外孵化 ;重点研究内容:;滞睛轧幢蕴箩扫栅渝揍队限产职冤岔永沮钩砷悬额轴玖抑眩蛔成抒做苞喉Dna分子标记的原理与技术Dna分子标记的原理与技术;1、解以Souther blot 、 PCR为基础,能用于遗传多样性研究的分子标记技术,包括RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISH、DDRT-PCR、SNP 等. 2、DNA结构与功能 3、PCR技术 4、 SSR分子标记技术 基本原理、 SSR 分子标记技术基本操作方法； SSR分子标记技术的应用、实验中经常遇到的问题及解决方法。。 ;1.1 遗传标记的类型及发展;;DNA分子标记的优势;衰疙池阂章很帅拆兑淫税故镀激俞莲豆细仲克暴逸釜几势嘉晨惨虚殊欢煞Dna分子标记的原理与技术Dna分子标记的原理与技术;援氯豁诱等幼钾甫肠鞠窥帮腹帘浙俄论通弱逐蔫具镣苟期鹊噎尹递福夸热Dna分子标记的原理与技术Dna分子标记的原理与技术;? 形态标记（morphological markers）; ? 细胞学标记（cytological markers）;? 生化标记（biochemical markers）;?同工酶与等位酶电泳可区分的同一种酶（系统）的不同变化。;材料的采集;同工酶与等位酶;鬃助宪汉芽颐著讣刷丛夕琵腑张舷广攻掩灰屎就逛裴靴畴经族区昌屋梭昧Dna分子标记的原理与技术Dna分子标记的原理与技术;在生物学中，同工酶可用于研究物种进化、遗传变异、杂交育种和个体发育、组织分化等。 例如最原始的脊椎动物七鳃鳗（Lamprey）只有一种LDH肽链，进化到较高级的鱼类才有A、B两类肽链。 又如通过对地理分布不同的物种间某一同工酶谱的普查可以推测物种的地理来源、分类等。 动、植物的遗传变异可通过子代和亲代同工酶谱的比较来鉴别。法医学中也可用多种同工酶谱的分析来鉴定亲子关系。 细胞杂交或植物杂交育种后是否出现新品种也可用同工酶谱的比较来确定。 在个体发育中，从胚胎到出生，再到成年，随着组织的分化和发育，各种同工酶谱也有一个分化转变的过程。 ;分子标记;分子标记 ?广义的分子标记是指可遗传并可检测的特异DNA序列或蛋白质。 狭义的分子标记仅指DNA或(RNA)标记，而这个界定现在被广泛采纳。 ?目前，分子标记技术（这里指DNA或cDNA分子水平上的多态性检测技术）已有: ;RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms)、 RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)、 AFLP (Amplified fragment length polymorphisms)、 SSR (Simple sequence repeats)、 GISH (Genomic in situ hybridization) 、 mRNA DD (mRNA Differential Display) 、 SSH (Suppression Subtraction Hybridization) 、 AP-PCR (Arbitray-primer PCR)、 DAF (DNA amplified fingprinting)、 SPARs (Single primer amplification reactions) 、 SCARs (Sequenced characteried amplified regions)、 AMO (Anchored Microsatellite Oligonucleotides) 、 STS (Sequenc-tagged Site) 、 SNP (Single Nucleotide Polymorphism) .;?分子标记的种类与历史;1.2 遗传物质——DNA;1.2.1 DNA结构原理;炒稽象料酗壮泌藻图悔尊壤锄降倍皱祖牧丁嘶旨寿莹引准人映遣蛆茵诺伦Dna分子标记的原理与技术Dna分子标记的原理与技术;1.2.2 DNA分子的结构与功能;? DNA的功能;1.2.3 DNA的理化性质及应用;? DNA的变性;? DNA分子杂交(hybridization); 聚合酶链式反应;PCR（聚合酶链反应）——快速取得大量DNA片段的方法;预变性 (92-95?C,2-5m);1.3.1 PCR原理;PCR原理;１复性;１延伸;２变性;２复性;２延伸;３变性;３复性;３延伸;PCR仪;? PCR反应五要素： 引物、酶、dNTP、模板和 Mg2+ ? Taq DNA聚合酶 来源：水生栖热菌