HPLC法测定大卫颗粒中黄芩苷含量.docVIP

HPLC法测定大卫颗粒中黄芩苷含量【摘要】 目的 测定大卫颗粒中黄芩苷的含量。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为C18柱（4．6 mm ×250 mm ，5μm），流动相为甲醇-0．2％磷酸（50?∶?50）检测波长280 nm。结果 黄芩苷在1．504～15．04μg范围内呈线性，平均回收率为99．04%，RSD＝0．87％（n＝6）。结论 本方法简便、灵敏，准确，可用于大卫颗粒的质量控制。? 【关键词】 HPLC法；大卫颗粒；黄芩苷? ? To establish the determination method of baicalin in Dawei Keli By HPLC method WANG Ming-jun ，TU Wei-jun， KUANG Cui-yi，et al.Department of Pharmacy,The First Affiliated Hospital of Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510080,China? 【Abstract】 Objective To establish the determination method of baicalin in Dawei Keli． Methods The HPLC method for baicalin was used． Column：ODS-C18（4．6 mm ×250 mm ，5μm）, mobile phase：methanol:0．2%H?3PO?4(50:50),UV wave length：280 nm。Result There was a good linear relationship in the range of 1．504～15．04μg, The average recovery was 99．04％,RSD was 0．87％（n＝6）.Conclusion This method is simple,accurate and reliable．It can be used for the quality control of Dawei Keli .? 【Key words】 HPLC；Dawei Keli；baicalin ? 大卫颗粒是由金银花、连翘和黄芩等六味药材组方而成，具有清热解毒，疏风透表的功效。用于感冒发热，头痛，咳嗽，鼻塞流涕，咽喉肿痛等症，对病毒性感冒、高热者尤适用。黄芩为方中主药之一，主要有效成分是黄芩苷，对其进行含量测定，可用于本品的质量控制。? 1 实验部分? 1．1 仪器与试药 Agilent 1100液相色谱仪包括紫外检测器（美国惠普），CLASS－vpV5．03色谱数据处理工作站（日本岛津）；CQ－250型超声波清洗器（330kHz，250W）。黄芩苷（供含量测定用，批号：715－200111）；甲醇为色谱纯，重蒸馏水（自制），其他试剂均为分析纯；大卫颗粒（自制）。? 1．2 方法与结果? 1．2．1 色谱条件 色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（4．6 mm ×250 mm ，5μm），流动相为甲醇－0．2%磷酸（50:50），流速1．0 ml/min?检测波长280 nm，柱温30℃，对照品溶液和供试品溶液各进样10 μl，理论板数按黄芩苷计算不低于5 000。其色谱图见图1。供试品中黄芩苷与其他组分峰均能达到基线分离，大卫颗粒中其他成分对测定无干扰。? 1．2．2 检测波长的选择 黄芩苷对照品用流动相制备溶液，在200～500 nm范围内扫描，在280 nm处有最大吸收，故以此波长进行含量测定。? 1．2．3 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的黄芩苷7．52 mg，置25 ml量瓶加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得黄芩苷0．3008 mg/ml对照品溶液。? 1．2．4 供试品溶液的制备 取本品内容物适量，研细，取约0．1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50 ml，称定重量，超声处理20 min，放冷，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，用0．45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。? 1．2．5 线性关系考察 分别精密吸取黄芩苷贮备液（0．3008 mg/ml）0．5、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0 ml，于10 ml量瓶中，用70％乙醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述各浓度对照品溶液10μl进样，按上述色谱条件测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归，得回归方程y=1．70504×105C-1261．2；线性范围为1．504～15．04μg，结果表明存在