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免疫球蛋白及IL-2浓度在小儿肺炎时免疫功能研究

免疫球蛋白及IL-2浓度在小儿肺炎时免疫功能研究【摘 要】 目的 选择免疫球蛋白及IL-2浓度两项免疫功能指标,探讨小儿支气管肺炎时免疫功能状况。方法 选择我院80例临床诊断支气管肺炎的住院患儿为观察组,其中男46例,女34例;年龄5~12月龄48例,12~36月龄21例,>36月龄11例。对照组:为20例年龄5个月~5岁门诊健康体检儿童。分别采静脉血1 ml,分离血清,进行免疫球蛋白及IL-2浓度的检测。结果 80例观察组患儿免疫球蛋白IgG、IgA、IgM值低于正常对照组,均有显著性差异。观察组IL-2浓度明显降低,与对照组差异显著。结论 血清免疫球蛋白及IL-2浓度的变化反映了机体免疫系统的功能状态,说明支气管肺炎患儿确实存在免疫功能低下。 ?【关键词】 支气管肺炎;免疫球蛋白;IL-2 支气管肺炎是小儿时期最常见的肺炎[1],我国北方地区多发生于冬春季,严重威胁小儿健康。同时小儿免疫系统发育不健全,免疫功能不完善可能是感染发生发展的重要原因。本文选择了免疫球蛋白及IL-2浓度两项免疫功能指标,探讨小儿支气管肺炎时免疫功能状况。 1 对象与方法 1.1 观察组:80例临床诊断支气管肺炎患儿,诊断参照第6版《儿科学》[1]。其中男46例,女34例;年龄5~12月龄48例,12~36月龄21例,>36月龄11例。对照组:为20例年龄5个月~5岁的门诊健康体检儿童。 1.2 方法 1.2.1 样本采集 支气管肺炎患儿,采静脉血1 ml,2 500 r/min离心10 min,留取上清即血清-20℃保存待用。 1.2.2 主要试剂 免疫球蛋白检测试剂盒购自中国北京华夏科海试剂公司;IL-2检测试剂盒购自法国DIACLONE公司。 1.3 实验步骤 1.3.1 免疫球蛋白的检测 方法参照试剂盒说明书,具体如下:取待测血清0.1 ml,加生理盐水0.3 ml混匀,测IgG、IgA取10 μl,测IgM取20 μl分别加入G、A、M板孔中,放置37℃湿盒中48 h,最后测沉淀环直径,查IgG、IgA、IgM含量表记录免疫球蛋白浓度。 1.3.2 IL-2含量的检测 方法按照说明书执行,具体如下:①按照要求分别稀释洗涤液(用蒸馏水1∶200稀释)、配制标准品(用前加200 μl蒸馏水)、辣根过氧化物酶(0.5 ml稀释液+5 μl STREP-HRP液,用前稀释);②建立IL-2标准稀释液从1 000、500、250、125、62.5至31.25 pg/ml梯度稀释浓度,空白孔加入100 μl标准稀释液,并加已知样品、控制品及待测样品各100 μl;③加稀释的抗体工作液50 μl至所有孔中。室温孵育1 h;④洗板3次;⑤加稀释后的HRP 100 μl至各个孔中。室温孵育30 min;⑥洗板3次;⑦加100 μl TMB于各个孔中,暗室内反应12~15 min;⑧加100 μl H2SO4,终止酶反应;⑨酶标仪上450 nm读原始数据。 所有OD值减去空白值后带入根据标准品做出的标准曲线,计算样品含量。 2 结果 2.1 免疫球蛋白检测结果 80例观察组患儿免疫球蛋白IgG、IgA、IgM值均普遍低于正常标准值,用门诊年龄5个月~5岁正常体检儿童做对照,观察组患儿免疫球蛋白IgG、IgA、IgM值亦低于正常对照组,均有显著性差异,尤以IgA明显。见表1。 2.2 IL-2含量检测结果 根据标准浓度OD值制作IL-2标准曲线方程:y=0.003 4x+0.124,并计算各个待测样品IL-2浓度(pg/ml),比较观察组及对照组IL-2浓度结果:观察组(20.61±7.43) pg/ml,对照组(41.09±15.25)pg/ml,观察组IL-2浓度明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.000 5)。 3 讨论 本研究对观察组患儿进行免疫功能研究发现:与正常对照组相比免疫球蛋白IgM、IgA、IgG含量与同龄健康对照组儿童相比降低,尤其以IgA差异显著。IgG、IgA、IgM均为抗感染抗体,在抗感染过程中起重要作用。已知IgA有血清型和分泌型两种,分泌型IgA主要分布在泪液、唾液、呼吸道、消化道等各种外分泌液中,是参与黏膜局部免疫的主要抗体,其可通过特异性结合进入黏膜局部的细菌、病毒等相应病原微生物,阻止病原黏附到细胞表面,或通过中和病原产生的毒素的毒性,从而发挥抗感染作用[2]。因此支气管肺炎患儿血清IgA、IgG、IgM含量较正常儿童减低,可能是疾病发病过程的部分原因和机制,或是疾病发生后抑制其分泌的结果。血清免疫球蛋白的变化反映了机体免疫系统的功能状态,说明支气管肺炎患儿存在体液免疫功能低下。 支气管肺炎象其他炎性反应一样产生

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