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含银涂层人工关节抗感染性能实验探究【摘要】 目的 建立兔股骨假体置换术后感染模型，探讨覆盖金属银/羟基磷灰石层的抗菌人工关节的抗感染性能。方法 采用普通的未镀银的人工关节假体做对照组，以覆盖银/羟基磷灰石层的人工关节假体为实验组，术后观察动物模型情况。结果 实验组术后感染情况明显优于对照组(P0．05)。结论 覆盖银/羟基磷灰石层的人工关节假体不仅具有良好的生物相容性，还具有抗菌作用。? 【关键词】人工关节假体；感染；银涂层 人工关节假体自100多年前应用于临床以来，虽获得巨大的发展，但有许多问题尚需解决，如植入人体后产生的感染问题。感染是关节置换术后的一个灾难性的并发症，给患者带来巨大的经济压力和精神打击。抗菌剂是指能够有效抑制微生物生长繁殖或可杀死病菌的物质。银系抗菌剂是抗菌效率最高的无机广谱抗菌剂，银抗菌剂被广泛用于抵御伤口和烧伤的感染。本课题在关节表面覆盖金属银/羟基磷灰石层，此种人工关节假体不仅具有良好的生物相容性，还具有抗菌作用[1]。? 1 资料与方法? 1．1 材料 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphy1ococcus aureus，MRSA)由四川大学华西医院检验科细菌培养室提供；兔股骨假体由本课题组自行设计提供(图1)；电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)由四川大学分析检测中心提供；实验动物为新西兰大白兔24只，体质量为3．2~4．8 kg，骨骼结实，被毛光泽，集中饲养，饲养室温度20℃，湿度60%。? 1．2 动物模型的建立 共分两组，分别采用普通的未镀银的人工关节假体做对照组，以覆盖银/羟基磷灰石层的人工关节假体为实验组，氯胺酮50 mg／kg肌肉麻醉，以右侧股骨转子为中心、作长4 cm的弧形切口，从右股前与外侧肌间隙进人髋关节，切除股骨头并保留股骨距2 mm。以自制髓腔锉扩髓。两组分别插入未镀银的人工关节假体和含银/羟基磷灰石涂层的人工关节假体，保持20°~30°的前倾角，逐层缝合(图 2)。MRSA使用前于37℃培养1 d，生理盐水配成菌液，用VITEK比浊仪粗测细菌浓度约1×10?7 CFU后，2h以内使用。共注入MRSA细菌混悬液0．6 ml，1×10?7 CFU的MRSA(分2次，第1次0．3 ml注入髓腔，第2次0．3 ml在关闭伤口前，注入关节腔)。? 1．3 检测指标 术后喂养4周，定期观察体温，一般情况，并检测血常规，以及血清C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)。4周后抽取右侧髋关节关节液并处死动物，观察右侧髋关节切口愈合情况，是否有红、肿、窦道，观察右髋关节的活动度。分别在关节囊、髋臼窝及股骨髓腔内各取组织1块，每块重约0．5 g，行细菌培养，2块或以上组织培养MRSA阳性则判定为感染；并对关节液进行培养，如果培养MRSA阳性则判定为感染[2-3]。电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测两组动物血中的银离子浓度，并观察是否存在银沉积病。? 1．4 统计学方法 计量资料采用(x±s)表示，采用t检验，计数资料采用百分比表示，采用卡方检验，以P0．05为差异有统计学意义。? 2 结果? 2．1 大体观察情况的比较 实验组切口全部愈合，局部无红肿，无窦道溢脓，多数站起活动，对照组有5只大白兔切口局部红肿，且活动量少。实验组关节内及假体周围组织未见明显感染迹象，对照组有8只大白兔关节内发现假体周围有炎性肉芽组织和黏稠样脓性分泌物。? 2．2 体温 两组动物的体温均波动在38．5℃~39．5℃，但实验组的体温明显低于对照组(P0．05)。? 2．3 细菌培养情况比较 实验组仍有2只兔的髋关节存在感染，感染率为16．66%；对照组有12只兔的髋关节存在感染，感染率为100%，两组比较差异有统计学意义(P0．001)。? 2．4 两组实验室检查情况比较 两组白细胞计数在2周末差异无统计学意义(P=0．09)，在4周末差异有统计学意义(P0．05)，实验组CRP值与对照组差异有统计学意义(P0．001)。? 2．5 假体的安全性 电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测发现实验组血中的银离子浓度(1．69±1．01)ppb，显著高于对照组血中的银离子浓度(0．031±0．008)ppb。实验组未发现银沉积病，假体周围组织切片也没发现异物肉芽肿和炎症反应(图3)。? 3 讨论? 全髋关节置换术后急性感染多数是金黄色葡萄球菌感染和表皮葡萄球菌。据美国疾病控制中心报道，35%的金黄色葡萄球菌为甲氧西林耐药[4]。耐药的金黄色葡萄球菌属于高毒性致病菌，在本实验中，对照组细菌培养全为阳性，达到了感染模型制备的目的。本研究中实验组的体温、C