基因工程 定义:利用人工的方法把生物的遗传物质在体外进行切割、拼接和重组,获得重组DNA分子,然后导入宿主细胞或个体,使受体的遗传特性得到修饰或改变的过程。 基因工程的特点 1、跨越天然物种屏障,实现动物、植物、微生物间的遗传物质交换。 2、只定向改变一个或少数几个性状,而不改变品种的其他特性。 3、可以人为控制基因的表达。 第二节 基因的分离 基因克隆通常包括三个步骤: 1)目标DNA片段(基因)的分离; 2)目标基因克隆到载体上; 3)载体导入宿主细胞并在其中大量复制。 一、工具酶 细菌细胞具有防御异源遗传物质(病毒)的进入的能力,异源DNA分子进入后,会被限制酶识别并降解,这个过程称为限制。 Ⅱ型酶有几个基本特性 ① 在DNA分子上有特异识别和切割的序列部位,使被切割的DNA分子形成单链的断裂; ② DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是直接相对的; ③ 断裂结果所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴(粘性末端),使其能够重新连接; ④ 内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成,即该类内切酶活性和甲基化作用活性是分开的,只需要Mg2+来激活,不需要ATP辅助因子。 (二)DNA连接酶 能催化DNA中相邻的 3’ –OH和5’ – 磷酸基 末端之间形成磷酸二酯 键并把两段DNA连接起 来。 (三)反转录酶 反转录酶(reverse transcriptas
原创力文档

文档评论(0)