自由基清除剂对大鼠脊髓损伤后NMDAR1表达影响.docVIP

自由基清除剂对大鼠脊髓损伤后NMDAR1表达影响【摘要】目的：观察自由基清除剂对大鼠急性脊髓损伤后NMDAR1表达的影响，探讨自由基清除剂对大鼠脊髓损伤的保护及促神经功能恢复的作用。方法：采用改良Allen法制作SD大鼠脊髓中度损伤模型，将模型鼠随机分为实验组和对照组各24只。实验组按3mg/kg的剂量将自由基清除剂依达拉奉用0.9％氯化钠溶液稀释后，每隔12h腹腔注射1次，给药时间为30min，共14d。对照组采用同样方式给予0.9％氯化钠溶液。观察脊髓组织的病理改变及用免疫组化方法测定1天、3天、7天和14天不同时间点大鼠脊髓内离子型受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-Methyl-D-aspartate receptors，NMDAR)表达的变化。结果:与外伤对照组比较，依达拉奉治疗组MMDAR1免疫阳性细胞数在1d时较低（P NMDAR是由NMDAR1和NMDAR2两种亚单位构成的异聚体，其中NMDAR1是构成受体通道的必须的组分，是NMDAR药理学和电生理学特性的基础[8]。因此，NMDAR1的蛋白表达能直接反映NMDAR的功能及状态。本研究通过观察NMDAR1的变化，从分子水平上来了解自由基清除剂治疗的疗效。实验结果表明，超短波治疗对脊髓损伤后NMDAR1的表达存在明显的“双向调节”，即可明显降低急性期的表达，并上调后期的表达。现代神经科学研究表明，正常情况下，谷氨酸与NMDAR结合，具有调节神经细胞功能，促进神经元生长发育，传递信息，参与学习、记忆等作用。故我们推测，自由基清除剂在早期可通过清除自由基、抑制脂质过氧化，降低细胞外谷氨酸浓度，抑制NMDA受体的过度激活，从而抑制神经细胞、血管内皮细胞的氧化损伤，达到减轻受损神经组织水肿，对神经元起保护作用；晚期则促进激活NMDA受体，对突触重建及神经功能的恢复起促进作用。 目前，自由基清除剂如依达拉奉，作为治疗脑损伤、脑卒中的一线药物，已在许多医院神经内科和神经外科广泛使用，许多医院的骨外科开始尝试将自由基清除剂用于治疗脊髓神经损伤，并取得了一定疗效。本研究客观地评价了自由基清除剂治疗脊髓损伤大鼠模型的疗效，以进一步说明自由基清除剂具有应用于临床的巨大潜力。 参考文献 [1]TAKAHASHI G,SAKURAI M,ABE K,et al. MCI186 Prevents Spinal Cord Damage and Affects Enzyme Levels of Nitric Oxide Synthase and Cu/Zn Superoxide Dismutase after Transient Ischemia in Rabbits[J].Thorac Cardiovasc Surg（S0171―6425），2003，126（5）：1461-1466. [2]Allen AR.Surgery of experimental lesion of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocaion of spinal colum[J].JAMA,1911,57：878-880. [3]Carmody RJ, Cotter TG，et,al. Oxidative stress induces caspase-independent retinal apoptosis in vitro.Cell Death Differentiation, 2000, 7: 282-291. [4]J. Kriz, G. Zupan and A. Simonic. Differential effects of dihydropyridine calcium channel blockers in kainic acid- induced experimental seizures in rats. 52 (2003), 215 225. [5]Ozaki M, et,al. Inhibition of the Rac1 GTPase protects against nonlethal ischemia/reperfusion-induced necrosis and apoptosis in vivo. FASEB J. 2000;14:418 429. [6]Kobayashi T,Kuroda S,Tada M，et al. Calcium induced mitochondrial swelling and cytochrome c release in the brain:its biochemical characterist