原生质体复合诱变选育刺芹侧耳木质素降解酶高产 - 高校化学工程学报.pdf

第24 卷第3 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.3 Vol.24 2010 年 6 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities June 2010 文章编号：1003-9015(2010)03-0462-06 原生质体复合诱变选育刺芹侧耳木质素降解酶高产菌株 陈 敏1,2, 姚善泾1 (1. 浙江大学 化学工程与生物工程学系, 浙江 杭州 310027; 2. 浙江工商大学 食品与生物工程学院, 浙江 杭州 310012) 摘 要：通过对刺芹侧耳(Pleurotus eryngii GIM 5.280)原生质体开展复合诱变及传代培养，以期得到遗传稳定的木质素 60 降解酶高产菌株。结果表明，通过25 s 紫外诱变刺芹侧耳原生质体，正突变率达 16%。对紫外诱变正突变株进行 Coγ 二次复合诱变再生，获得五株正突变突出菌株。经过摇瓶发酵实验，发现这五株菌株产木质素降解酶能力较出发菌株 明显提高。同时开展高产菌株的传代培养，检验其传代稳定性。连续传代四代测试结果表明，007 号和 167 号菌株遗 传的稳定性表现突出，发酵液中木质素降解酶产量稳定。尤其是007 号菌株产酶可达到110 U⋅mL− 1，比出发菌株的酶 活表达量提高54.3% 。复合诱变能明显提高刺芹侧耳产木质素降解酶能力。 关键词：刺芹侧耳，原生质体，复合诱变，木质素降解酶 中图分类号：TQ926 文献标识码：A Multiple Mutagenesis of Pleurotus eryngii Protoplast for Screening High-Yield Strains of Ligninolytic Enzymes CHEN Min1,2, YAO Shan-jing1 (1. Department of Chemical and Biological Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China; 2. College of Food Science Bioengineering, Zhejiang Gongshang University, Hangzhou 310012, China) Abstract: Pleurotus eryngii is an important white-rot fungus which is capable of producing ligninolytic enzymes. Using Pleurotus eryngii GIM 5.280 as starting strain, the UV and 60Coγ irradiation mutagenesis of its protoplast and serial subcultivations were conducted for the screening of high-yield strains of ligninolytic enzymes. The results show that, for UV irradiation, the exposure time