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第六章_生产菌种生产
第六章 生产菌种 的生产; 种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。
;种子扩培的目的: ;一、孢子的制备
(一)放线菌孢子的制备
采用琼脂斜面培养基,培养基中含适合产包子的麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和无机盐等,碳源和氮源不要太丰富。温度28或37℃,培养5~14天。;(二)霉菌孢子的制备
以大米、小麦、玉米、麸皮等天然农产品为培养基。温度25 ~ 28℃,培养4 ~ 14天。;(三)细菌孢子的制备
细菌的斜面培养多采用限制碳源而氮源丰富的牛肉膏、蛋白胨培养基。温度37 或28℃,培养5~10天。
;二、种子的制备 ;(一)实验室阶段 ; 获得一定数量和质量的孢子;2、培养基选择的原则;3、起始接种物的传代问题;(二)生产车间阶段;2、培养基选择的原则;3、发酵级数的确定;发酵级数确定的依据;放线菌发酵生产的工艺流程;青霉素生产的种子制备制备过程 ;1.斜面孢子 ;2.大米孢子;3.一级 种子;谷氨酸生产的种子制备制备过程 ;1、斜面 ;2. 一级种子(摇瓶) ;3. 二级种子(种子罐);种子的质量要求: ;第二节 种子质量的控制;一、影响孢子质量的因素及其控制;(一)培养基;(二)培养温度和湿度;(三)培养时间和冷藏时间; 过于年轻的孢子经不起冷藏,过于衰老的孢子会导致生产能力下降。
孢子冷藏的时间宜短不宜长。; 母瓶:活化、纯化,使保藏菌种生长,并去处变异株。
所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。
;二、影响种子质量的因素及其控制; 种子质量重要受孢子质量、培养基、种龄和接种量等因素影响。摇瓶种子的质量主要以外观颜色、效价、菌丝浓度和黏度以及糖代谢、pH变化为指标。;(一)培养基;(二)培养条件;(三)种龄;
细菌 7~24小时
霉菌 16 ~50小时
放线菌 21 ~64小时;(四)接种量;过大过小都不好,最终以实践定,如霉菌素发酵的接种量为0.1%~1%,肌苷酸发酵接种量为1.5% ~2%,霉菌的发酵接种量为10%,大多数抗生素为7-15%。但是一般认为大一点好。;(五)种子质量标准;(六)种子异常分析;(七)种子质量的控制措施 ;菌种稳定性的检查;;杂菌检查;本章小节:;作业
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