淀粉酶在汉逊酵母和毕赤酵母中表达分析.pdfVIP

菌 物 学 报 25 4 573~578, 2006 Mycosystema 超耐热酸性 -淀粉酶基因在多型汉逊酵母中表达及与在毕 赤酵母中表达的比较研究 1, 2 3 4 4 1∗ (1 中国科学院微生物研究所 北京 100080; 2 中国科学院研究生院 北京 100049; 3 三元基因有限公司 北京 100083; 4VA Medical Centre 111C5, Department of Medicine University of California at San Francico 4150 Clement Street, San Francisco, CA 94121, USA) 摘 要 利用毕赤酵母的质粒载体 pPIC9K 将极端耐热古菌 Pyrococcus furiosus 的超耐热酸性 α-淀粉酶 (Amy) 基因转化到多型汉逊酵母 HP-6 中 获得重组汉逊酵母 经过甲醇进行诱导 表达产物的酶活性检 测和 SDS电泳 证明 α-淀粉酶(Amy)在多型汉逊酵母中利用 AOX1 启动子和 α-因子信号肽有效表 达并分泌到胞外 该酶的最适反应温度为 90 100 最适作用 pH 为 4.0 5.0 较之重组毕赤酵母的最 适作用 pH 还低 0.5 此外与毕赤酵母的重组蛋白相比 重组汉逊酵母 α-淀粉酶不仅菌株筛选简便 周期 短 而且具有更容易筛选到高拷贝转化子以及适用于大规模工业发酵等优点 关键词 Pyrococcus furiosus AOX1 启动子 MOX 启动子 α-因子信号肽 中图分类号 Q939.97 文献标识码 A 文章编号 1672-6472 2006 04-0573-0578 Comparison between the expression of extremely thermostable and acid-stable amylase gene in Hansenula polymorpha and that in Pichia pastoris HAO Shuai1,2 GUO Jian-Qiang3 LI Yun-Min4 YUE Li-Li4 JIAO Qing-Hua1* 1 2 ( Institite of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, China; Graduate School, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China; 3Sanyuan Gene Limited Company,Beijing 100083, China; 4 VA Medical Centre 111C5, Department of Medicine University of California at San Francico 4150 Clement Street,San Francisco, CA 94121, USA) Abstract: A recombinant vector pPIC9K-Amy which carries the extremely thermostable and acid-stable α-amylase from Pyrococcus furiosus was transformed into Hansenula polymorpha HP-6 strain.