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实训十 土壤速效磷含量的测定
(0.5mol/LNaHCO3浸提-钼锑抗比色法)
一、目的要求
土壤速效磷也称土壤有效磷,包括水溶性磷和弱酸溶性磷,其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。测定土壤速效磷的含量,可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理,掌握其测定方法。
二、方法原理
用pH8.5的0.5mol/L的NaHCO3作浸提剂处理土壤,由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解,降低了溶液中Ca2+浓度,乡音的提高了磷酸钙的溶解度。由于浸提剂的pH较高,抑制了Fe3+和Al3+的活性,有利于磷酸铁和磷酸铝的提取。此外,溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子,也有利于吸附态磷的置换。用NaHCO3作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性,其适应范围也广泛。
浸出液中的磷,在一定的酸度下,用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝,蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比,因此,可以用比色法测定其含量。
三、主要仪器
震荡机、分光光度计或光电比色计、天平(0.01g)、三角瓶(250ml)、容量瓶(50ml)、漏斗、无磷滤纸、移液管(10ml)。
四、试剂配制
1.0.5mol/L的NaHCO3 (pH8.5)浸提液 称取化学纯NaHCO342.0g溶于800ml蒸馏水中,以4mol/L NaOH溶液调节pH至8.5(用pH计测定),然后稀释至1000ml,保存在试剂瓶中。如果贮存期超过1个月,是用时应重新调整pH。
2.无磷活性炭 将会活性炭先用1:1(V/V)的盐酸浸泡过夜,在布氏漏斗上抽滤,用蒸馏水冲洗多次至无Cl-为止,在用0.5mol/L NaHCO3溶液浸泡过夜,在布氏漏斗上抽滤,用蒸馏水洗尽NaHCO3,检查至无磷为止,烘干备用。
3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液 在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水,蒋烧杯浸在冷水中,然后缓慢注入208.3ml浓硫酸(分析纯),并不断搅拌,冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于60℃
4.钼锑抗混合显色剂 称取1.50g抗坏血酸(左旋,旋光度+12~+22,分析纯)溶于100ml钼锑抗贮存液中,混匀。此试剂有效期为24h,宜用前配制,随配随用。
5.磷标准液 准确称取在105℃烘箱中烘干2h的分析纯KH2PO40.2195g
6.磷标准曲线绘制 分别吸取50mg/L磷标准液0、1、2、3、4、5(ml)于50ml容量瓶中,各加入0.5mol/L的NaHCO3浸提液1ml和钼锑抗显色剂5ml,除尽气泡后定容,充分摇匀,即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L的磷的系列标准液。30min后与待测液同时进行比色,读取吸光度值。再方格坐标纸上以吸光度值为纵坐标,磷mol/L为横坐标便绘制成磷标准曲线。
五、操作步骤
1.待测液的制备 称取通过1mm筛孔的风干土样5.00g置于250ml三角瓶中,加入一小勺无磷活性炭和0.5mol/L的NaHCO3浸提液100ml,塞紧瓶塞,在震荡机上震荡30min,取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤,滤液用另一只三角瓶盛接。同时作空白试验。
2. 测定 吸取滤液10ml(对含P2O51%以下的样品吸取10ml,含磷高的可改为5ml或2ml,但必须用0.5mol/L的NaHCO3补足至10ml),于50ml容量瓶中,加钼锑抗混合显色剂5ml,小心摇动。30min后,在721或722型分光光度计上用波长660nm(光电比色计用红色滤光片)比色,以空白液的吸收值为0,读出待测的吸光度值。
六、结果计算
土壤速效磷(mg/L)=
式中:待测液mg/L——从标准曲线上查得待测液浓度;
待测液体积——50ml;
分取倍数——浸提液总体积(ml)为吸取浸出液体积(ml)的倍数(100/10);
烘干土重——风干土重乘以水分系数。
七、注意事项
(1)钼锑抗混合显色剂的加入量要准确。
(2)加入混合显色剂后,即产生大量的CO2气体,由于容量瓶口小,CO2气体不易逸出,在混匀的过程中易造成试液外溢,造成测定误差,因此必须小心慢慢加入,同时充分摇动排出CO2,以避免CO2的存在影响比色结果。
(3)活性炭一定要洗至无Cl-反应,否则不能使用。
(4)此法温度影响很大,一般测定应在20~25℃的温度下进行。如室温低于20℃,可将容量瓶放在30~
(5)0.5mol/L的NaHCO3测土壤有效磷分级可参考下列指示
土壤速效磷的含量
(mg/kg)
<10
10~20
>20
土壤供磷水平
低
中等
高
八、复习思考题
1.为什么报告有效磷测定结果时,必须同时说明所用的测定方法?
2.测定过程中,如要获得比较准确的结果,应注意哪些问题?
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