水稻、小麦、玉米、谷子、高粱等谷物籽粒中粗淀粉含量测定.docVIP

GB 5006—85 　　本标准适用于水稻、小麦、玉米、谷子、高粱等谷物籽粒中粗淀粉含量的测定。 1　测定原理 　　淀粉是多糖聚合物，在一定酸性条件下，以氯化钙溶液为分散介质，淀粉可均匀分散在溶液中，并能形成稳定的具有旋光性的物质。而旋光度的大小与淀粉含量成正比，所以可用旋光法测定。 2　仪器和设备 2.1　分析天平：感量0.001 g。 2.2　实验用粉碎机。 2.3　电热恒温甘油浴锅：119±1℃，浴锅内放入工业甘油，液层厚度为2 cm左右。 2.4　旋光仪：钠灯，灵敏度0.01度。 2.5　锥形瓶：150 ml，250 ml。 2.6　容量瓶：100 ml。 2.7　滤纸直径：15～18 cm，中速。 3　试剂配制 3.1　氯化钙－乙酸溶液：将氯化钙（CaCl2·2H2O，分析纯）500 g溶解于600 ml蒸馏水中，冷却后，过滤。其澄清液以波美比重计测定，在20℃条件下调溶液比重为1.3±0.02；用精密pH试纸检查，滴加冰乙酸（见GB 676—78《冰乙酸》，分析纯），粗调氯化钙溶液pH值为2.3左右，然后再用酸度计准确调pH值为2.3±0.05。 3.2　30％硫酸锌溶液（W/V）：取硫酸锌（ZnSO4·7H2O，见GB 666—78《硫酸锌》，分析纯）30 g，用蒸馏水溶解并稀释至100 ml。 3.3　15％亚铁氰化钾溶液（W/V）：取亚铁氰化钾（K4Fe（CN）6·3H2O GB 1273—77《亚铁氰化钾》，分析纯）15 g，用蒸馏水溶解并稀释至100 ml。 4　样品的选取和制备 4.1　将样品挑选干净（带壳种子需脱壳），按四分法缩减取样约20 g。 4.2　将选取的样品充分风干或在60～65℃的条件下约烘6 h后粉碎，使95％的样品通过60目筛，混匀，装入磨口瓶备用。 5　测定步骤 5.1　称样：称取样品2.5 g，准确至0.001 g。按GB 3523—83《种子水分测定法》测定水分含量。 5.2　水解：将称好的样品放入250 ml锥形瓶中，在水解前5 min左右，先加10 ml氯化钙－乙酸溶液湿润样品，充分摇匀，不留结块，必要时可加几粒玻璃珠，使其加速分散，并沿瓶壁加50 ml氯化钙－乙酸溶液，轻轻摇匀，避免颗粒粘附在液面以上的瓶壁上。加盖小漏斗，置于119±1℃甘油浴中，要求在5 min内达到所需温度，此时瓶中溶液开始微沸，继续加热25 min。取出放入冷水槽，冷却至室温。 　　注：通过实测得知氯化钙－乙酸溶液的沸点为118～120℃，当甘油浴的温度回升至119±1℃时，样品瓶中溶液开始微沸，因此也可根据瓶中液体沸腾程度，校准控温仪的温度。 5.3　提取：将水解液全部转入100 ml容量瓶中，用30 ml蒸馏水多次冲洗锥形瓶，洗液并入容量瓶中。加1 ml硫酸锌溶液，摇匀，再加1 ml亚铁氰化钾溶液，充分摇匀以沉淀蛋白质。若有泡沫，可加几滴无水乙醇消除。用蒸馏水定容，摇匀，过滤，弃去10～15 ml初滤液，滤液供5.4测定。 5.4　测定：测定前，用空白液（氯化钙－乙酸液∶蒸馏水＝6∶4）调整旋光仪零点，再将滤液装满旋光管，在20±1℃下进行旋光测定，取两次读数平均值。 6　结果计算 6.1　计算公式 　　粗淀粉（干基）的含量按下式计算。 式中：α── 在旋光仪上读出的旋转角度； L── 旋光管长度，dm； W── 样品重，g； 203── 淀粉比旋度； H── 样品水分含量，％。 6.2　结果表示 　　平行测定的数据用算术平均值表示，保留小数后两位。 6.3　允许相对误差 　　谷物籽粒粗淀粉含量的两个平行测定结果的相对误差不得大于1.0％。 附　录　A 样品的脱脂与脱糖 （参考件） A.1　谷物种子内含可溶性糖和脂肪较少，经过多次洗糖与不洗糖、脱脂与不脱脂对比试验证明，其中有的谷物籽粒（小麦、水稻、高粱等）粗淀粉测定结果极相近，均在允许误差范围之内，故本标准不要求脱脂与脱糖处理。如遇有特殊样品（脂肪含量超过5％，可溶性糖含量超过4％）需要脱脂或脱糖时，可将称好的样品放入50 ml离心管中，用乙醚脱脂，然后用60％热乙醇（以重量计）搅拌，离心，倾去上清液，重复洗至无糖反应为止。最后用60 ml氯化钙-乙酸溶液将离心管内残留物全部转入250 ml锥形瓶进行粗淀粉测定。 　　附加说明： 　　本标准由中华人民共和国农牧渔业部提出。 　　本标准由黑龙江省农业科学院综合化验室起草。 　　本标准主要起草人赵铁男、孟广勤。