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蚌埠医学院毕业论文 题目：性发育异常综合症的核型分析 及SRY基因检测 姓名：刘君 专业：生物科学 学号：10510910024 指导老师：鲍明升、张静 研究背景 性发育异常是人类遗传学研究的重大课题，研究表明：性染色体异常是导致性别发育异常的主要原因，而SRY基因（雄性决定因子的最佳候选基因）是性别决定与分化的主要基因，其突变、缺失、易位均可导致性分化异常。 故本文对相关患者进行染色体核型分析和SRY基因检测，从细胞和分子水平上研究其发病原因。 研究目的 研究性染色体异常对性发育的影响，结合SRY基因检测，分析SRY基因在性别决定与分化中的作用，探讨性发育异常的发病机制。 研究方案 外周血淋巴细胞培养：抽取患者外周血接种培养，于收细胞前2-4h加入适量秋水仙素，阻断细胞周期在有丝分裂中期。 染色体标本制备和显带：选择细胞分裂相较好、染色体个数完整的标本进行染色，注意控制染色时间，需要进行C显带的标本要进行C显带，分析患者核型。 DNA提取：用接种后余下的外周血，用试剂盒进行DNA提取，提取的DNA取小部分进行电泳检测，均出现较一致的稳定条带。 PCR扩增及SRY基因检测：以提取的DNA为模板，使用PCR扩增试剂盒，以及特定的上下引物扩增SRY基因。患者的扩增产物与阴阳对照组及空白组同时进行电泳检测，并使用马克检测扩增产物的分子量。 结果 染色体核型分析：有4例患者的社会性别与染色体性别不相符：3例为46，XY女性，1例为46，XX男性。还发现1例45，X女性患者，1例46，XX，Del(Xp)患者，1例47，XXY患者，其余6例患者的社会性别与染色体性别一致，但都伴有不同程度的性发育异常。 SRY基因检测结果：有6例患者SRY基因检测结果与染色体性别不一致：1例46，XY女性患者SRY基因为阴性，1例46，XX男性患者SRY基因为阳性，1例46，XX女性患者和1例45，X女性患者SRY基因为阳性，两例46，XY男性患者SRY基因阴性；其余7例患者SRY基因与染色体性别一致。 讨论 从上述结果可以看出：性染色体异常是导致性发育异常的主要原因。6例SRY检测结果与染色体核型不一致患者中：1例46，XY女性患者和2例46，XY男性患者SRY为阴性，提示SRY基因缺失；1例46，XX男性患者和1例46，XX女性患者及1例45，X女性患者SRY为阳性，其可能机制是父方精子形成过程中，X染色体的短臂和Y染色体的短臂易位，这样携带SRY基因的X染色体型精子与卵子结合便形成上述3例患者。另外从以上患者表型可以看出，一些患者的SRY检测结果与其社会表型不一致，表明SRY基因并非性别决定与分化的唯一基因，而是与其他基因一起调控人类的性发育与性别分化。 结论 大量研究及本论文都表明：性染色体异常是导致性发育异常的主要原因，而SRY基因的缺失或易位是导致性反转综合症的最主要原因 。同时相关报道及本文都有一些病例，SRY基因检测结果与患者社会表型并不一致，提示SRY基因并非性别决定与分化的唯一基因，而是与其他基因共同调节人类的性别发育。 * 图1，一例46，XY男性性反转核型 图2，一例46，XX女性性反转核型 图3，13例患者及二例正常对照者DNA电泳成像图 图4，马克、阳阴性对照、空白对照、13例患者SRY基因检测成像图 *