柽柳内生链霉菌CLR304 抗MRSA 次级代谢产物 - 中国医药生物技术.PDF

514 中国医药生物技术 2015 年12 月第10 卷第6 期 Chin Med Biotechnol, December 2015, Vol. 10, No. 6 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.06.010 ·论著· 柽柳内生链霉菌CLR304 抗MRSA 次级代谢产物304A 的研究 刘少伟，李舟，胡辛欣，游雪甫，孙承航 【摘要】 研究较少，尤其是对放线菌，这一具有重要药用价 目的 从沙生植物柽柳来源的内生链霉菌 CLR304 发酵液 值的微生物的研究更加稀少[4-5] 。为此，本课题组围 中分离鉴定具有强抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA ） 绕柽柳根际和内生环境，在我国新疆地区展开了一 活性的次级代谢产物。 系列药用放线菌资源勘探相关研究，并取得了一些 研究结果[6-9] [10] 方法 基于 16S rRNA 基因序列，对菌株 CLR304 进行初 。另外根据报道 ，采集了北京房山 步分类鉴定；采用液体发酵、溶剂萃取、正相硅胶层析、薄 地区野生柽柳，从根部分离到一株具有广谱抗菌活 层层析以及高效液相制备分离纯化 CLR304 的活性次级代 性的内生放线菌菌株 CLR304 。本文报道该菌株的 谢产物 304A ；根据紫外光谱、高分辨质谱和核磁共振波谱 初步鉴定、该菌株产生的具有抗耐甲氧西林金黄色 及文献比对，鉴定化合物 304A 的平面结构；采用琼脂稀 葡萄球菌（MRSA ）次级代谢产物 304A 的分离纯 释法测定化合物的抗菌活性。 化和结构鉴定及抗菌活性等相关的研究结果。 结果 菌株 CLR304 为链霉菌，从其发酵液中分离获得抗 MRSA 次级代谢产物 304A ，证明为维吉尼霉素 M1 。抑菌 1 材料与方法 活性实验显示其对葡萄球菌、屎肠球菌的敏感株和耐药株均 1.1 材料和仪器 1.1.1 菌株 菌株 CLR304 为从北京房山柽柳 具有较强活性（MIC = 1 ~ 4 μg/ml ）。 根部分离得到的内生放线菌；抑菌活性测试所用检 结论 首次从柽柳中获得产生维吉尼霉素 M1 的内生链霉 定菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA ）、枯草芽 菌，表明沙生植物柽柳蕴含药用放线菌资源。 孢杆菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、 【关键词】 柽柳； 内生放线菌； 次级代谢产物； 维 肺炎克雷伯菌由中国医学科学院医药生物技术研 吉尼霉素 究所保存。 中国医药生物技术, 2015, 10(6):514-521 1.1.2 培养基 斜面培养基（高氏一号琼脂培养基）：可溶性 植物内生菌（endophytes