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一:研究前景 二:研究目的及意义 三:研究的内容及方法 四:研究的结果及结论 前景 1、目前所知,一般的抗肿瘤药物如环磷酰胺、丝裂霉等都有诱发体细胞染色体畸变的毒副作用,已有研究报道,ADM也具有致畸变效应,可以引起细胞遗传学上的改变 。 2、皂苷大多具有明显的抗氧化作用,皂苷可能对抗癌药导致人淋巴细胞微核和染色体的损伤有保护作用。 目的及意义 1、探讨阿霉素对人淋巴细胞微核和染色体的影响以及皂苷对阿霉素导致淋巴细胞微核和染色体的保护作用 2、通过对阿霉素的研究,了解其作用机制,可以在临床应用时控制 ADM的剂量 ,同时提示在使用 ADM时 ,可以辅助抗突变治疗 ,以降低其对机体的突变作用以及可以与皂苷联合应用保护机体不受损伤 最后在37℃培养箱中进行培养68-72小时 2、人淋巴细胞微核实验方法 3、细胞染色体实验方法 预期结果 1、通过观察微核与染色体量的变化来分析阿霉素对人淋巴细胞微核和染色体的影响以及皂苷对阿霉素导致淋巴细胞微核和染色体的保护作用。 2、分别比较6组的实验结果若A组和F组相比有染色体和微核畸变则ADM对有损伤作用,若B、C、D、E组的畸变比A组小则皂苷具有保护作用,否则没有。B,C,D,E组比较可以大体知道皂苷的最佳保护范围。 * * 皂苷对阿霉素导致人淋巴细胞微核和 染色体损伤的保护 08生物实验三班三组 组员:耿卫峰、耿志军、李科、李小刚 项秋萍、金良玉、鲁兰红 汇报人:李小刚 指导老师:吴华彰 2011.3.15 苯并芘
取一个人外周血12ml,取12个培养瓶,每瓶加5ml RPMI 1640培养液,0.4ml肝素抗凝剂,0.2ml植物血凝素,加1ml人外周血 。 1、实验分组 F(对照组) 400 / E 250 / D 100 / C 250 0.02 B / 0.02 A 皂甙(μg/ml) AMD (μg/ml) 分组 实验分组及药物用量 每组取1份 1500r/min离心 8min,弃上清 0.5 ml的小牛血清 (将沉淀细胞悬浮起来) 每个玻片滴一滴 空 气 中 自 然 干 燥 甲醇固定15min 晾干 DAPI染色10min pH 9的PBS 洗涤背景 晾干 等比例的甘油和 PBS(pH7.2~7.4) 封片 镜检 微核1000 计算 发生率 每组取1份 终止前4小时 秋水仙素0.5ml 取出 37℃水 浴30min Carnoy固 定液固定 15 min 1500 r/min 离心8 min 弃上清 0.4 ml 固定液 混匀成细胞 悬液滴片 10%的 Giemsa染 色10 min 观察中期 分裂相 计数染 色体畸 变率
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