转录因子OCT鄄4 对靶基因AP鄄2酌表达调控的研究 - 生物化学与生物.PDF

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2013, 40(1): 43~49 录因子OCT 4 对靶基因AP 2酌 表达调控的研究* ** ** *** 赵晓蒙 王 成 李晓峰 张晓婷 刘喜枝 周 畅 (湖南师范大学生命科学学院，蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室，长沙4 10081) 摘要 OCT-4 和AP-2 是近年来睾丸生殖细胞瘤诊断过程中研究的热点基因 作为一个在胚胎发育中起着重要作用的转录 因子，OCT-4 基因在发育的不同时期、不同分化过程中发挥着多种生物学功能，其作用是通过对靶基因的调控来实现的 本 研究运用多种软件分析，发现AP-2 启动子区域的序列部分有OCT-4 的结合 点 利用CHIP-PCR 方法鉴定AP-2 是 OCT-4 调控的靶基因 应用Luciferase assay、免疫荧光实验、小鼠隐睾模型等实验进行验证，OCT-4 基因抑制AP-2 转录活 性和影响其蛋白质水平的表达 这一新发现，有利于从分子水平上研究睾丸生殖细胞瘤的发生机制 关键词 睾丸生殖细胞肿瘤，OCT-4，靶基因，AP-2 学科分类号 Q789 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2012.00203 睾丸生殖细胞肿瘤(testicular germ cell tumors ， 蛋白作为转录因子，调控下游基因表达的分子机制 TGCT)是一组由不同发病机制、不同病理组织和临 研究受到人们的广泛关注并取得了很大进展 [1] 床表现构成的多样性肿瘤 ，占睾丸癌90% 以上， OCT-4 基因含有一个保守的DNA 结合结构域——— [2] 好发于20～40 岁的青年男性 欧美过去50 年内 POU 结合域，通过结合含ATGCAAAT 的八聚体 5 睾丸生殖细胞肿瘤的发病率已经达到 11/ 10 在我 结构域而活化下游靶基因的启动子或增强子，从而 [6] 国虽然不是最常见的泌 生殖系统肿瘤，但目前发 调控下游靶基因的转录 2005 年，Boyer 等 利用 病率呈上升趋势，其发病原因尚未完全知晓[3] 置分析法在基因水平上确定出人类胚胎 细胞中 最近临床病理标本的观察结果发现，M2A、 有623 个(3%) 蛋白质编码基因的启动子与OCT-4 PLAP 、CD 117、OCT-4 和AP-2 是非常敏感和特 直接关联 对一些OCT-4 下游靶基因的研究表明， 异的标志物，对生殖细胞肿瘤的鉴别诊断具有重要 OCT-4 可能正调控维持细胞全能或多能性状态所需 意义 其中OCT-4 和AP-2 是重要的转录因子， 基因的转录，或者可能负调控与体细胞分化有关基 有着重要的生理功能 OCT-4 基因也被称为 因的转录 然而这些对于OCT-4 靶基因的研究仍 OCT-3、POU5F1 ，定位于染色体6p21.3，其编码 然是远远不够的 [4] [5] 的蛋白质是一种POU 转录因子 Rajpert 等 通过 Victor 等运用ChIP-on-ChIP 芯片实验鉴定睾丸 研究OCT-