Genes in a Bottle 瓶中DNA的提取Capture Your Unique Essence!.PPTVIP

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2017-09-06 发布于天津
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* Genes in a Bottle 瓶中DNA的提取 Capture Your Unique Essence! Wang Lie（汪洌） Fang Yu （方瑜） Guo Jing（郭婧）生物医学科学研究技能I Genes in a Bottle Workshop Timeline Introduction Background on DNA Extraction Extract Genomic DNA from Cheek Cells Prepare DNA Necklaces 生物医学科学研究技能I Relevance of DNA Isolation Isolation of DNA is often the first step before further analysis DNA profiling Cloning Disease diagnosis DNA sequencing Genetically modified organisms (GMO) -agriculture, pharmaceutical Environmental testing, biodefense 生物医学科学研究技能I DNA Structure双螺旋结构碱基对 = 阶梯排列顺序 = 信息“文本” 生物医学科学研究技能I Methods of DNA Extraction1. Genomic DNA2. Non-genomic DNA 生物医学科学研究技能I Genomic DNA CTAB法 (植物DNA) Hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基三甲基溴化铵 SDS 法(动物DNA) 其它 — 物理方式：玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法 — 化学方式：异硫氰酸胍法、碱裂解法 — 生物方式：酶法 …… 试剂盒（离心柱法） Methods of DNA Extraction1. Genomic DNA2. Non-genomic DNA 生物医学科学研究技能I Non-Genomic DNA 质粒DNA — 碱裂解法 — 煮沸法细胞器DNA — 差速离心法 What are the Structures of the Cell? 生物医学科学研究技能I Methods of Genomic DNA Extraction ? Use a simple water mouthwash to collect cheek cells ? Add Lysis buffer to cells to break open cell and nuclear membranes and release nuclear contents ? Digest sample with protease to degrade proteins ? Precipitate DNA with cold alcohol in high salt ? Transfer precipitated DNA into necklace Tips！ — spend enough time （30s recommended） collecting mouth cells. — invert your tube gently. 生物医学科学研究技能I 生物医学科学研究技能I Gently invert tube to rupture cell and nuclear membrane Incubate at 55℃ for 15 minutes to digest all cellular protein What do you see? Methods of Genomic DNA ExtractionExtract Genomic DNA from Cheek Cells Genes in a Bottle Kit Why Perform Each Step? 生物医学科学研究技能I Cell CollectionGently chewing the inside of the mouth combined with a water mouth wash is used to dislodge epithelial cells lining the mouth Ample cell collection is critical for success. 生物医学科学研究技能I 2. Lysis BufferWhat is Lys