尼古丁在人椎间盘髓核细胞退变中作用.pdf

生 物 骨 科 材 料 与 临床 研 究 20l7年 2月 ORTHOPAEDIC BIOMECHANICS M ATER1ALS AND CLINICAL STUDY 第 14卷 第 1期 doi：10．3969~．issn．1672—5972．2017．01．004 文章编号：swgk2016—03—00055 尼 古 丁 在 人 椎 问 盘 髓 核 细 胞 退 变 中 的 作 用水 黄宇峰 雍之瑶 刘晓明 李浩曦 王善金 巴兆玉 沈彬 赵卫东 昊德升 [摘要]目的探讨不同浓度及时问的尼古丁在人椎间盘髓核细胞退变中的作用。方法随机选择5例腰椎骨折患者 的椎间盘髓核组织进行体外细胞培养 ，种于 12孔板 中，按照 0、1、33-3、100、200、500ngm／L的尼古丁浓度 以 及 1、2、3、7、10天加入来培养，每组细胞用 Trizol法提取总 RNA，用荧光定量PCR测定AQP1，AQP3和 1I 型胶原 (Collagen)以及蛋白多糖 (Aggrecan)的mRNA表达。用 SPSS19．0进行统计分析。结果 随着尼古丁浓 度升高及培养时间的延长，髓核细胞形态变化 明显，贴壁能力减弱，胞质减少 ，胞核萎缩 ，空泡形成 ，凋亡增 加。且细胞AQP1及AQP3的mRNA水平随着尼古丁浓度及时间的增加而降低，II型胶原及蛋白聚糖 mRNA水 平也降低 ，细胞发生退变。结论 尼古丁会降低人椎间盘髓核细胞 AQP1和 AQP3的表达，进而 降低髓核细胞 II 型胶原和蛋白聚糖的表达，促进椎间盘退变 ，且作用时间越长，浓度越高，细胞退变越严重。 [关键词]尼古丁；椎 间盘 ；髓核细胞；退变；水通道蛋白 【中图分类号】R318 [文献标识码】A I’heeffectofnicotineonhumannucleuspuiposuscells HuangYufeng,Yong,~uyao,LiuXiaoming,eta1．DepartmentofSpineSurgery,Shangl~EastHospital, 硼咖 200120,China IAbstractl0bjectiveToevaluatetheeffectofnicotineonhtedegenerationofhumannucleuspulposuscells．Methods 5patientsundergoinglumbardiscectomysurgeriesinOur departmentwererandomlyincluded．Thenucleuspulposustis— sueswereculturedinwellplateandhteconcentrationsofnicotinewere0， 1， 33．3， 100，200， 500ng／mL．After1， 2，3，7，10days，RNAofcellswereextractedusingTrizo1．ThemRNAexpressionofAQP1，AQP3，collagenII andAggrecanwerevaluedbyrtPCR．DataanalysiswasdonebySPSS19．0．ResultsW ithanincreaseinnicotinecon— centrationandculturetime，htemorphologyofnucleuspulposuschangedsignificantly,weakeningoftheadherentability, showingdecreaseofcytoplasm，atrophyofcellnucleusnadincreaseofapotosis．ThemRNAexpressionofAQP1and AQP3alsodecreasedan