薄层色谱分离技术.pdf

生药学 薄 层 色 谱 生药学 特点 薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品 在一块板上点上多个样品 同时进行分离 对样品制备要求高，必须 用毕一次弃去，可直接用 不含可吸留在柱上的杂 样品的粗提物点样 质，否则柱性能受损 可用检测器种类较少 展开后可用多种手段检测 生药学 薄层色谱与柱层析和纸层析比较 (1)快速(数十秒~数十分钟) (2)分离效率高 (3)灵敏度高 (斑点扩散小,比纸色谱高10-100倍) (4)显色方法多样(腐蚀性显色剂) (5) 图象易保存 生药学 薄层色谱分离技术 第一节 薄层色谱概论 第二节 制备薄层色谱 第三节 离心薄层色谱 第四节 制备型加压薄层色谱 生药学 第一节 薄层色谱概论 薄层色谱 (Thin-Layer Chromatography TLC) • 是快速分离、定性和定量分析的一种非常重要 的色谱技术。 • 它是将固定相涂布于玻璃，铝铂，塑料片等载 板上形成一均一薄层。将被分离的物质点加在 薄层的一端，置展开室中，选用适当的展开 剂，借毛细作用从薄层点样的一端展开到另一 端，使性质不同的物质得以分离。 生药学 甘草胶束薄层指纹图像 甘草胶束薄层指纹图像 1 2 3 4 5 6 未经衍生的甘草胶束荧光图像（UV366nm ） 1，2 ：光果甘草；3，4 ：胀果甘草；5，6：乌拉尔甘草 生药学 生药学 没药的薄层 生药学 一、TLC的分离原理 分离原理随所用固定相不同而不同，可分为: (l) 吸附薄层色谱 采用硅胶、氧化铝等吸附剂铺成薄层，利 用吸附剂表面对不同组分吸附能力的差别达到分离的目的。 (2) 分配薄层色谱 由硅胶、聚酰胺和纤维素铺成薄层，不同 组分在指定的两相中有不同的分配系数。 (3) 离子交换薄层色谱 由含有交换活性基团的纤维素铺成薄 层。 (4) 分子排阻薄层色谱 也称凝胶薄层。利用样品中分子大小 不同、受阻情况不同加以分离。 (5) 亲和薄层色谱 利用酶、受体、抗原抗体特异性识别作用。 生药学 二、TLC 的技术参数