树干毕赤酵母菌对内醚糖的利用.pdfVIP

树干毕赤酵母菌对 内醚糖 的利用 代江红 ，余志晟 ，王晓燕 ，张洪勋 1(中围科学院研 究生院资源与环境学院，北京 ，100049) 2(北京林业大学生物科学与技术学院，北京 ，100083) 摘 要 研究了树干毕赤酵母菌(Pichiastipitis)对 内醚糖 的利用及发酵产 乙醇的情况。结果表 明，与对葡糖糖 的利用相 比，树干毕赤酵母 菌利用 内醚糖 的效率较低 ，且不能发酵产乙醇。然 而，在 内醚糖和葡萄糖同时存在 的 情况下，内醚糖可促进树干毕赤酵母 的生长 ，乙醇产率也获得提高。在 YPD培养基 中添加 0．1％ 内醚糖 ，细胞 浓度和乙醇产率最高，其 中细胞浓度提高 14．3％，乙醇产率提高25．4％。 关键词 内醚糖，树干毕赤酵母菌，乙醇发酵 利用纤维素生物质生产燃料乙醇，在解决能源 母菌，均无利用内醚糖的能力 ，筛 出的 1株具有较强 问题和环境污染方面有 巨大潜力 。。 。然而 由于纤 内醚糖 同化能力 的斯 达油脂酵母菌 (Lipomycesstar— 维素结构致密复杂，很难通过酶法将其分解成可发酵 keyiYZ一215)菌发酵 内醚糖时不产 乙醇。最近 ，本 的单糖 ，这阻止 了纤维 素的乙醇转 化 。一些研究 课题组分离、纯化了它的内醚糖激酶 ，并成功克隆、表 发现，纤维素在一定的热解条件 (高温 、缺氧)下可生 达了内醚糖激酶基因 ” 。把内醚糖激酶的氨基酸 成以内醚糖 (Levoglucosan，1，6-脱水一6．D一吡喃葡萄 序列提交到 NCBI进行 BLASTP检索 ，发现树干毕赤 糖 ，简称 LG)为主的热解产物 “ 。而 以内醚糖作为 酵母菌 (P．stipitis)有 内醚糖激酶基因。这暗示树干 微生物的有效底物进行生物转化 ，无疑为纤维素生物 毕赤酵母菌能利用 内醚糖 。 质的乙醇转化提供了一条新途径 。 课题组研究树干毕赤酵母菌对 内醚糖 的单独利 目前 ，研究人员已从 自然界筛选获得了部分能直 用及发酵 ，以及与葡萄糖 的混合发酵，旨为 内醚糖作 接同化内醚糖 的微生物菌株 ，并实现了对某些产品的 为树干毕赤酵母菌的一种发酵添加剂提供实验依据 ， 内醚糖生物直接转化，如衣康酸 、柠檬酸的生产 ； 进而为内醚糖作为真菌的一种发酵添加剂提供实验 而且进一步发现不少真菌能通过一种 内醚糖激酶催 依据 。 化 内醚 糖 ，生 成 6一磷 酸 葡 糖 ，进 入 糖 代 谢 被 利 1 材料与方法 用 。。然而 目前已发现的真菌利用内醚糖的效率 普遍较低 ，原因是 内醚糖激酶对 内醚糖 的亲和力较 1．1 菌株和培养基 低 ，K 高达 48～l02mmol／L… ；另外，现有 的酿酒酵 树干毕赤酵母菌 (P．stipitisNBRC10063=CBS 母菌很少能利用 内醚糖。Prosen 等筛选 到 1株酿 6054)：购 自日本技术评价研究所生物资源中心 (Bio· 酒酵母菌 (SaccharomycescerevisiaeNRRLY132)能直 logicalResourceCenter，NationalInstituteofTechnolo— 接发酵 内醚糖产 乙醇，但是对 内醚糖的转化率只有葡 gYandEvaluation)。 萄糖的 l／3。Nakagawa 等筛选 了 6株毕赤酵母菌 YPD培养基 (g／L)：酵母粉 10，蛋 白胨 20，葡萄 (Pichiaspp．)，发现 1株能利用 内醚糖 ，但不产 乙醇 ， 糖 20，琼脂 20；液体培养基不加琼脂。 以及 17株酵母菌 (Saccharomycesspp．)不能利用 内 YPLG培养基 (g／L)：酵母粉 10，蛋 白胨 20，内醚 醚糖